Helmholtz-Gemeinschaft

Ergebnisse & Diskussion
schluss und maximalem Füllvolumen von 1,9 ml auf dem in Abb. 45 gezeigten Mehrfachmagnetrührer
durchgeführt (Kapitel 3.10.1.1).
Abb. 45: Versuchsaufbau zur Untersuchung der Rührstabilität mit dem Mehrfachmagnetrührer mit 60
Stellplätzen. Abb. ohne Thermobad.
Zunächst sollte der Effekt des Rührsystems auf die BAL und die BFDH281A ermittelt
werden. Zum einen, um den Einfluss des Rührmodus auf die Enzymstabilität zu ermitteln
und zum anderen, um die Eignung des gewählten Systems für weitere Analysen zu erproben.
Falls es bereits durch den Magnetrührer zur Inaktivierung der Enzyme käme, wäre dieser
Versuchsaufbau für weitere Analysen nicht geeignet.
Daher wurden die Einflüsse von starkem Rühren auf die Stabilität der Enzyme zuerst nur in
wässrigem Puffer, mit einer minimierten und einer großen Wasser/Gas-Interphase untersucht.
In einem gerührten System kann die Grenzfläche zwischen Gas (bzw. Luft) und Lösung
ebenfalls einen negativen Effekt auf die Stabilität von Enzymen haben (Caussette et al., 1999,
Colombie et al., 2001). Als Kontrolle diente eine ungerührte Probe, die ohne Zugabe eines
Rührfisches auf dem Magnetrührer platziert wurde (Abb. 46). Nach 24 h unter Rühren
wurden die Aktivität sowie der Anteil des löslichen Proteins bestimmt, um die Inaktivierung
anhand des Aktivitätsverlustes und der Proteinaggregation, die letztendlich zur Präzipitation
führt, zu bestimmten (Kapitel 3.10.1.1). Vorversuche hatten gezeigt, dass beide Enzyme BAL
und BFDH281A bei 25 °C (ohne Rühren) innerhalb von 24 h nur geringe Aktivitätsverluste
zeigten (max. 10%), was bei den folgenden Versuchen kaum ins Gewicht fällt.
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