Helmholtz-Gemeinschaft

Ergebnisse & Diskussion
A
Lysine an Pos. 124
B
Lysine an Pos. 127
C
Abb. 72: Oberflächendarstellung der BFD (A) und der BAL (B) sowie ein Querschnitt durch die BAL zur
Ermittlung der relativen Position von Lys127 der einzelnen Monomere zueinander (C). Die einzelnen
Monomere der BAL sowie der BFD sind in blau, gelb, grün und rosa dargestellt Die im Zentrum der Enzyme
liegenden Lysinreste an Position 124 der BFD und an Position 127 der BAL sind rot markiert. Aufgrund der
weniger kompakten Struktur an den Kontaktflächen der vier Monomere in der BAL, ist das Lys127 in der BAL
theoretisch Lösungsmittel zugänglich (vergrößert in B dargestellt, Lys127 in rot). Die Zugänge zu zwei aktiven
Zentren der BAL sind durch weiße Pfeile gekennzeichnet (B). Die anderen beiden aktiven Zentren liegen diesen
genau gegenüber. Im Querschnitt der BAL (C) sind zusätzlich zur Oberflächendarstellung die Strukturen der
Lys127 erkennbar und durch graue Pfeile hervorgehoben. BFD: PDB 2v3w; BAL: PDB 2AG0. Die Abbildungen
wurden mit dem Programm PyMOL erstellt.
Versuche zur chemischen Modifikation der BAL über eine Acetylierung der Aminogruppen
von Lysinen mit zyklischen Anhydriden zeigten eine hohe Inaktivierung der BAL von etwa
70-99%. W -Aminogruppen mit sterisch sehr
anspruchsvollen Polyethylenglycol-Derivaten (mPEG 750 oder mPEG 2000 ) zu keinem
Aktivitätsverlust führte (van den Wittenboer, 2009). Aufgrund des geringen Molekulargewichts
der Anhydride sind auch Aminosäurereste zugänglich, die nicht direkt an der
Oberfläche exponiert vorliegen, wohingegen mPEG nur mit Aminosäureresten an der
Enzymoberfläche reagieren kann (Abb. 73) (van den Wittenboer, 2009). Die verwendeten
Anhydride entsprechen hinsichtlich ihres Molekulargewichts ungefähr den aromatischen
Aldehyden, so dass Enzymbereiche welche den Anhydriden zugänglich sind, sterisch auch für
die Benzaldehydmoleküle erreichbar sein sollten (Abb. 73). Diese Beobachtungen unterstützen
die Vermutung, dass Lys127 ein möglicher Angriffspunkt für die aromatischen
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