Helmholtz-Gemeinschaft

Ergebnisse & Diskussion
Wie aus Abb. 48 ersichtlich, sind die Werte mit und ohne Argon untereinander vergleichbar,
eine Oxidation der Enzyme spielt hier also keine entscheidende Rolle. Möglicherweise hat die
Flüssig/Gas-Interphase einen inaktivierenden Effekt auf die BAL. Allerdings kann nicht
ausgeschlossen werden, dass der Einfluss des Rührens durch das geringere Probenvolumen
hervorgerufen wird.
Vergleichende Analysen mit der BFD Variante zeigten zunächst ein anderes Bild. Obwohl die
BFDH281A bei vorangegangen Arbeiten im Vergleich zur BAL stets höhere Halbwertszeiten
zeigte und die Analysen in einem auf die Stabilität bezogenen üblicherweise optimalen pH
durchgeführt wurden, nämlich pH 6,5 anstelle von pH 8, war schon nach wenigen Stunden
eine weiße Trübung erkennbar. Nach spätestens 24 Stunden unter Rühren war die BFDH281A
vollständig präzipitiert und somit inaktiv (Abb. 49).
Aktivität
lösliches Protein
relative(r) Aktivität / Anteil lösl. Protein
1,0
0,8
0,6
0,4
0,2
0,0
1,9 ml 0,6 ml
Abb. 49: Restaktivität und löslicher Proteinanteil der BFDH281A nach 24 h Rühren. Links: Die Aktivität
und der Proteingehalt der ungerührten Kontrollen nach 24 h wurden jeweils als 1 definiert. Die Volumina der
gerührten Proben betrugen 1,9 und 0,6 ml. Magnetrührer 1400 Upm; 0,5 mg/ml BFDH281A in 50 mM Kpi-
Puffer, pH 6,5; 0,1 mM ThDP; 2,5 mM MgSO 4 : T=25°C; n=3. Rechts: Präzipitation der BFDH281A nach 3 h
unter Rühren.
Um auch hier Oxidationsprozesse auszuschließen, wurde derselbe Versuch mit Argon
gesättigtem Puffer und Argon überschichteten Proben durchgeführt. Wie bereits bei der BAL
beobachtet, konnte bei Verwendung des Inertgases keine erhöhte Enzymstabilität beobachtet
werden. Allerdings befindet sich im Testsystem eine weitere hydrophobe Oberfläche, die
bisher noch nicht diskutiert wurde, da sie im Falle der BAL keinen entscheidenden Einfluss
auf die Stabilität hatte. Hierbei handelt es sich um einen mit Teflon überschichteten
Rührfisch, dessen hydrophobe Oberfläche möglicherweise zur partiellen Auffaltung und
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