Chromosome segregation errors: a double-edged sword - TI Pharma

More documents

Recommendations

Info

verdeling van tumorcellen compleet te ontregelen. Dit leidt tot een ernstige verstoring van de hoeveelheid DNA in de dochtercellen en uiteindelijk celdood. Hoofdstuk 6 borduurt voort op dit concept door de functie van het Mps1 eiwit te remmen door middel van een Mps1 bindende stof, een inhibitor genoemd. Ook het toevoegen van een lage dosis van deze Mps1 inhibitor leidt tot tumorceldood, terwijl gezonde cellen onbeschadigd blijven. We hypothetiseren dat dit komt doordat tumorcellen meer afhankelijk zijn van de functie van Mps1. Deze afhankelijkheid kan komen doordat tumorcellen een abnormale hoeveelheid chromosomen hebben en hierdoor meer tijd nodig hebben om te delen, terwijl gezonde cellen efficienter door mitose gaan en hierdoor minder afhankelijk zijn van Mps1. Het laatste experimentele hoofdstuk, hoofdstuk 7, beschrijft de ontwikkeling van een systeem waarbij we in muizen ‘live’ naar tumorcellen kunnen kijken. Door verschillende eiwitten een bepaald kleurtje te geven, kan de beweging van deze eiwitten in tumorcellen gevolgd worden door de camera. We hebben de eiwitten in tumorcellen zo gekleurd dat we zowel de chromosoomverdeling tijdens mitose als het begin van celdood kunnen volgen. Dit systeem is daardoor uiterst geschikt om te kijken naar de manier waarop tumorcellen in het lichaam reageren op bepaalde chemotherapeutica. Na behandeling van muizen met Docetaxel, een chemotherapeuticum dat momenteel in de kliniek gebruikt wordt voor de behandeling van kanker, hebben we gevonden dat tumorcellen in het lichaam anders reageren dan in de celkweek. Docetaxel pakt in de celkweek specifiek de delende cellen aan, terwijl tumorcellen in een levend organisme gedood worden onafhankelijk van de celdeling. Dit hoofdstuk geeft het belang van onderzoek in organismen weer en laat zien dat cellen in de celkweek anders kunnen reageren op chemotherapeutica dan in het lichaam. In Hoofdstuk 8 worden de experimentele data van dit proefschrift bediscussieerd in het licht van de relevante literatuur. Tevens worden nieuwe ideeën voor toekomstig onderzoek naar chromosoom missegregaties gesuggereerd. 177 Addendum &
& Curriculum Vitae Aniek Janssen werd geboren op 19 april 1983 te ’s-Hertogenbosch. In 2001 behaalde zij haar Gymnasium diploma aan het Jeroen Bosch College te ’s-Hertogenbosch. In hetzelfde jaar startte ze met de opleiding Biologie aan de Universiteit Utrecht, die ze in november 2006 afrondde met de Master Developmental Biology and Biomedical Genetics. Gedurende deze Master begon ze op het Nederlands Kanker Instituut te Amsterdam aan haar stage van negen maanden in het laboratorium van Prof.dr. René Medema onder begeleiding van Dr. Renske van Leuken. Tijdens deze periode verhuisde het lab naar het Universitair Medisch Centrum Utrecht, waar ze haar stage-onderzoek afrondde. Daarna vertrok Aniek voor 6 maanden naar het laboratorium van Prof.dr. Stephen Schoenberger op het La Jolla Institute for Allergy and Immunology te La Jolla, Californië, USA. Na voltooiing van haar master begon ze in december 2006 aan haar promotieonderzoek, beschreven in dit proefschrift, bij de afdeling Medische Oncologie van het Universitair Medisch Centrum Utrecht onder begeleiding van Prof.dr. René Medema en Prof.dr. Geert Kops. In januari 2012 verhuisde het laboratorium terug naar het Nederlands Kanker Instituut te Amsterdam, waar ze haar onderzoek in december 2012 afrondde. Begin 2013 zal Aniek haar onderzoekscarrière voortzetten in het laboratorium van Dr. Gary Karpen aan de University of California te Berkeley, USA. 178
Page 2 and 3:
Chromosome segregation errors: a do
Page 4 and 5:
Chromosome segregation errors: a do
Page 6:
Get up, stand up, stand up for your
Page 10 and 11:
Chapter 1 General Introduction Anie
Page 12 and 13:
cytoplasms and pinches off the memb
Page 14 and 15:
which sister-chromatids are not pro
Page 16 and 17:
Non-MCC members, but important mito
Page 18 and 19:
completely separated. Following cle
Page 20 and 21:
Two striking features of cancer cel
Page 22 and 23:
predisposition at a very young age,
Page 24 and 25:
that aberrant spindle formation inc
Page 26 and 27:
(Fig.7C). As discussed in section 4
Page 28 and 29:
Thesis outline Chromosome segregati
Page 30:
286,395,407,408 Increase (thymus) I
Page 33 and 34:
2 Abstract Various types of chromos
Page 35 and 36:
2 34 A C D E % of cells Control 100
Page 37 and 38:
2 assess whether cytokinesis induce
Page 39 and 40:
2 A Asynchronous Monastrol release
Page 41 and 42:
2 for 14 hours (unless indicated ot
Page 43 and 44:
2 Immuno Blotting Cells were lysed
Page 45 and 46:
2 Supplemental figures 44 A B C % o
Page 47 and 48:
2 A MCF7 B C 53BP1 foci/cell 46 % o
Page 49 and 50:
2 A siLuc siATM C 48 p-S1981 ATM me
Page 51 and 52:
2 50 A B C % of EdU positive cells
Page 54 and 55:
Chapter 3 Studying Chromosomal inst
Page 56 and 57:
Introduction Aneuploidy is a common
Page 58 and 59:
activity by ~80% 170-172 . With the
Page 60 and 61:
A WT/CiMKi T649A Embryo’s: Figure
Page 62 and 63:
control treated MEFs (unpaired t te
Page 64 and 65:
Materials and Methods Cloning targe
Page 66 and 67:
- Loop out BamHI site with site-dir
Page 68 and 69:
Primers: pGH_pA_FW#2: TCTATGGCTTCTG
Page 70 and 71:
was prepared using standard procedu
Page 72:
71 Cre-inducible Mps1 knock-in mous
Page 75 and 76:
4 Abstract Most of the current drug
Page 77 and 78:
4 Two other interesting mitotic tar
Page 79 and 80:
4 inhibition of the anti-apoptotic
Page 81 and 82:
4 cluster their centrosomes. This
Page 83 and 84:
4 of checkpoint function can be ach
Page 85 and 86:
4 4.5 Disadvantages of exploiting m
Page 88 and 89:
Chapter 5 Elevating the frequency o
Page 90 and 91:
Introduction Error-free chromosome
Page 92 and 93:
Partial depletion of Mps1 or BubR1
Page 94 and 95:
death is not induced in the short t
Page 96 and 97:
had survived growth for 7 days in t
Page 98 and 99:
The following antibodies have been
Page 100 and 101:
Supplemental data Supplemental figu
Page 102 and 103:
A BubR1 α-tubulin Hela-TetRBubR1 -
Page 104 and 105:
- doxycycline + doxycycline - doxyc
Page 106 and 107:
A B C percentage of cells % PI posi
Page 108 and 109:
Abstract One of the most common hal
Page 110 and 111:
clear accumulation of cells in mito
Page 112 and 113:
the mice did not receive any doxycy
Page 114 and 115:
113 Chromosome missegregations kill
Page 116 and 117:
Chapter 6 Aneuploid tumor cells are
Page 118 and 119:
Introduction Equal segregation of t
Page 120 and 121:
S1A, data not shown). Based on thes
Page 122 and 123:
A B U2OS + H2B-YFP percentage of ce
Page 124 and 125:
tumor cells, leaving diploid cells
Page 126 and 127:
A B p-S10-Histone H3 DAPI C µmol/l
Page 128 and 129: Supplemental Figure-1. Protein bioc
Page 130 and 131: Bioavailability of compound-5 after
Page 132: A B U2OS (7.5nM) Hela (10nM) RPE-1
Page 135 and 136: 7 Abstract Taxanes, such as docetax
Page 137 and 138: 7 of mitotic aberrations. These dat
Page 139 and 140: 7 A Low CFP lifetime High CFP lifet
Page 141 and 142: 7 docetaxel treatment in vitro resu
Page 143 and 144: 7 chromosome unstable, which means
Page 145 and 146: 7 Cells (~50.000/well) were plated
Page 147 and 148: 7 Supplemental data Supplemental fi
Page 149 and 150: 7 148
Page 151 and 152: 8 Thesis summary Unequal separation
Page 153 and 154: 8 exerted through contraction of th
Page 155 and 156: 8 1.4 NoCut: preventing the inducti
Page 157 and 158: 8 tumorformation using intravital i
Page 160 and 161: Addendum References Nederlandse sam
Page 162 and 163: 41. McEwen, B.F., et al., CENP-E is
Page 164 and 165: 2010. 6(5): p. 359-68. 124. Liu, S.
Page 166 and 167: 210. Stucki, M., et al., MDC1 direc
Page 168 and 169: tumors in mice. Cancer Res, 2007. 6
Page 170 and 171: adiotherapy in breast cancer. Breas
Page 172 and 173: 470. Marcus, A.I., et al., Mitotic
Page 174 and 175: 559. Kienitz, A., et al., Partial d
Page 176 and 177: Nederlandse Samenvatting Celdeling,
Page 180 and 181: Publications A. Janssen, R.H.Medema
Page 182 and 183: En dan zijn er nu nog een aantal li
Page 184 and 185: promotie-stukjes! Je bent een voorb
Page 186: edankt voor al jullie hulp bij de i
show all

Chromosome segregation errors: a double-edged sword - TI Pharma

Create successful ePaper yourself

Delete template?

Save as template?