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universita - Clinica pediatrica - Università degli Studi di Trieste

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d) PRECIPITAZIONE DELLA PCR DI SEQUENZA<br />

1) Aggiungere 3 μl <strong>di</strong> NaAc 3M pH=5 + 57 μl <strong>di</strong> EtOH 100% e agitare.<br />

2) Tenere in ghiaccio per 15'.<br />

3) Centrifugare a 13000 rpm per 15' a 4°C.<br />

4) Eliminare il surnatante.<br />

5) Aggiungere 200 μl <strong>di</strong> EtOH 70% freddo.<br />

6) Tenere in ghiaccio per 5'.<br />

7) Centrifugare a 13000 rpm per 15' a 4°C.<br />

8) Eliminare il surnatante.<br />

9) Asciugare per 10' in stufa a 60°C.<br />

10) Risospendere in 10 μl <strong>di</strong> H2O mQ calda (60°C).<br />

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