Appunti Biochmica Applicata CTF - Capitolo1 - Omero

Metodo di BradfordIl legame del colorante Coomassie Brilliant Blue G-250 alle proteinedetermina uno spostamento del massimo di assorbimento del coloranteda 465 nm (rosso) a 595 nm (blu) in soluzioni acide (BradfordBradford, 1976)Tale colorante nella sua forma anionica forma forti complessi non covalenticon le proteine tramite interazioni elettrostatiche con gruppi amminici (Arg) etramite forze di van der WaalsIl colorante è preparato come soluzione stock in acido fosforico (colore marrone).Il metodo è un semplice procedimento costituito da un unico passaggioin cui il colorante è aggiunto ai campioni e si determina l’assorbanza a595 nm. Quando è legato alle proteine il colore ritorna blu.