Appunti Biochmica Applicata CTF - Capitolo1 - Omero

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Metodo di BradfordPoiché l’intensità della colorazione non èlineare in una vasta gamma di concentrazionidi proteine, si raccomanda fortemente dipreparare una curva standard per ognisaggio.Sensibilità: fino a 5 µg di proteinaVariazione della colorazione per proteinediverse dovuto al loro contenuto di residuibasici.
Semplicità di preparazione del reattivo Sviluppo del colore immediato Stabilità del complesso Elevata sensibilità (fino a 22 µg/ml) Il saggio è compatibile con la maggior parte dei tamponi, degli agenti denaturanticome guanidina·HCl6 M e urea 8 M e dei conservanti come sodio azide. Il reagente colora le cuvette ed è piuttosto difficile da rimuovere La quantità di colorante che si lega alla proteina dipende dal contenuto inaminoacidi basici → ciò rende difficile la scelta di uno standard Molte proteine non sono solubili nella miscela di reazione acida
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