Appunti Biochmica Applicata CTF - Capitolo1 - Omero

Tipi di gel: destrani a legami crociati(Sephadex), agarosio(Sepharose, Bio-Gel A), poliacrilammide (Bio-Gel P),poliesteri, gel di silice, poliacrilomorfolina e polistireni.La cromatografia ad eslusione viene utilizzata per vari scopi: purificazione: la principale applicazione di questacromatografia è la purificazione delle macromolecole biologiche(proteine, ormoni, anticorpi, acidi nucleici e polisaccaridi).Si possono separare anche composti a basso peso molecolare:aminoacidi da peptidi, peptidi da proteine, oligonucleotidiottenuti per idrolisi parziale degli acidi nucleici, ecc; determinazione del peso molecolare: il peso molecolare sicalcola in base a tR o a Vr che per le proteine globularidipende dal peso molecolare; dissalazione: usando una colonna di Sephadex G-25 si possonoseparare soluti ad alto peso molecolare dai sali o dai solventiorganici. Infatti, mentre le macromolecole vengono eluite conil volume vuoto, i sali, a basso peso molecolare, vengonotrattenuti dalla colonna. Questo metodo di dissalazione è piùrapido ed efficiente di quello per dialisi: si applica perallontanare il fenolo da preparazioni di acidi nucleici, ilsolfato d'ammonio da preparazioni di proteine, ecc.