Sundhedsstyrelsens nye retningslinier - DSOG

Bilag 8. Test for HPV
Test til påvisning af HPV
Der er udviklet mange forskellige metoder til påvisning af HPV-DNA og RNA. De store
randomiserede undersøgelser er hovedsageligt gennemført med to tests udviklet til påvisning
af HPV-DNA fra 13 til 14 højrisiko typer. Den ene HC-II testen (15) er godkendt af
FDA, den anden test er en PCR reaktion, der er baseret på amplifikation af DNA med generelle
primere oftest Gp5+/Gp6+ (16) eller MY09/11 (17). Ingen af disse tests identificerer
den/de aktuelle HPV typer.
Udover de to omtalte metoder findes der en række andre metoder til påvisning af HPV
nucleinsyre samt flere detektionsmetoder til typning af HPV. I de Europæiske guidelines,
2. udgave fra 2008 findes en detaljeret gennemgang af disse metoder med henvisning til
fordele og ulemper for de individuelle tests. En oversigt ses nedenfor med en kort gennemgang
af principperne i de forskellige tilgængelige metoder. Dertil kommer, at der i
marts 2009 blev FDA godkendt endnu en metode, Cervista TM , til påvisning af 14 højrisiko
HPV typer (18).
HPV-DNA baserede tests, der kan bruges uden typebestemmelse.
Hybrid capture 2
Denne metode er baseret på påvisning af HPV-DNA ved hybridisering af en generel RNA
probe til det i patientprøven forekomne HPV-DNA, en test der er kommercielt tilgængelig
(Digene Corp., Gaithersburg, Maryland, USA). Hybriden påvises ved binding af
DNA/RNA hybrid specifikke antistoffer koblet til et enzym, hvilket tillader en let og
kvantitativ detektion af HPV- DNA, uden at dette først er amplificeret. Metoden tillader
påvisning af 13 højrisiko HPV typer: HPV16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 og
68 (19). Der findes en alternativ detektionsblanding, der tillader påvisning af lavrisiko typerne
HPV6, 11, 42, 43 og 44. Metoden er godkendt til screening for livmoderhalskræft i
kombination med cytologi (uden at der ved HPV screening typebestemmes).
Cervista TM HPV HR
Denne metode er godkendt af FDA i marts 2009 og er baseret på Invader teknologi (Hologic
TM , Madison, USA). Detektionen er baseret på en signal amplifikationsmetode, hvor
”invader” oligonucleotid og en probe oligonucleotid begge hybridiserer til DNA target. Et
enzym kan kløve proben. Den frigivne 5’ ende af proben binder til et FRET system, der
afgiver en målelig fluorescens. Metoden kan påvise de samme 13 typer som HC-II plus
HPV66. Metoden er også udviklet til at typebestemme HPV16 og 18. Metoden er udviklet
til anvendelse på ”ThinPrep R” prøver.
PCR amplifikation med generelle primere Gp5+/Gp6+
Metoden er udviklet til påvisning af HPV-DNA amplificeret fra L1 genet (150 bp stort
fragment) og den har en høj sensitivitet og specificitet for påvisning af ”high grade CIN”
(CIN3) (16). Ved anvendelse af digoxigenin mærket PCR probe og enzymkoblet streptavidin
er assayet velegnet til anvendelse på et stort prøvemateriale. Testen kan påvise højrisiko
typerne HPV16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 og 68 samt lavrisiko typerne
HPV6, 11, 40, 42, 43 og 44 (uden at prøven nødvendigvis typebestemmes).
PCR amplifikation med generelle primere My09/011
Metoden er baseret på samme princip som den beskrevet ovenfor, men primerne amplificerer
et større fragment af L1 genet (450 bp). Detektions metoden er baseret på anvendelsen
af biotinylerede primere. Den tillader identifikation af højrisiko typerne 16, 18, 26, 31,
33, 35, 39, 45, 51, 52, 55, 56, 58, 59, 68 (ME180), MM4 (W13B), MM7 (P291), og MM9
(P238A) og af lavrisiko typerne 6, 11, 40, 42, 53, 54, 57, 66, og MM8 (P155) (20) (uden
at prøven nødvendigvis typebestemmes).
Screening for livmoderhalskkræft. Anbefalinger 2011
118