Elektronenmikroskopische Untersuchungen an Probenmaterial von ...

Ergebnisse
lung zeigte sich für Titandioxid, Krokydolith, Toner und Carbon black eine statistische
Signifikanz.
4.6 Induktion von Apoptose durch Fasern und Partikel
Die Analyse der Apoptose wurde mittels FACS durch eine
Annexin V-FITC-Färbung durchgeführt (vgl. Abschnitt 3.7).
Die Induktion der Apoptose durch die Asbestfasern Krokydolith
und Chrysotil wurde bereits in Vorversuchen mit Rinderfibroblasten
untersucht (wie die Abb. 69 und die Abbildungen
2-5 im Anhang 6 darstellen). Dabei wurden eine Expositionszeit
von 6 und 12 Stunden sowie eine Konzentration von
5 µg/cm² gewählt. Für Chrysotil wurde im Gegensatz zu Krokydolith
nach 12 Stunden Exposition eine erhöhte Apoptoseinduktion
ermittelt.
Abb. 69:
Apoptoseinduktion in den 3T3-Zellen durch Krokydolith und Chrysotil nach einer Expositionszeit
von 12 Stunden bei einer Konzentration von 5 µg/cm².
Tab. 5: Prozentuale Verteilung frühapoptotischer, spätapoptotischer, nekrotischer und vitaler 3T3-
Zellen nach FACS-Analyse mit Durchflusszytometrie ± Standardabweichung.
Die Exposition gegenüber den verschiedenen Fasern und Partikeln erfolgte über 24 Stunden. Für die
Expositionen wurden für Cisplatin 100 µM, für Chrysotil 5 µg/cm² eingesetzt. Die Expositionen mit
Krokydolith, Titandioxid, Toner und Carbon black erfolgten mit 10 µg/cm².
(Anzahl der Versuche n = 4)
Frühapoptotisch Spätapoptotisch Nekrotisch Vitale
(Annexin pos.) [%] (Annexin/PI pos.) [%] (PI pos.) [%] (ungefärbte) [%]
Kontrolle 0,9 ± 0,4 3,2 ± 3,1 8,9 ± 3,8 87 ± 4
Cisplatin 0,4 ± 0,3 0,9 ± 0,6 12,5 ± 3,5 86,2 ± 3,1
Chrysotil 0,4 ± 0,4 0,4 ± 0,3 10,4 ± 3,5 88,8 ± 3,3
Krokydolith 0,3 ± 0,4 0,2 ± 0,2 12,7 ± 3,1 86,9 ± 2,9
Titandioxid 1,4 ± 1,7 2,7 ± 3,9 10,5 ± 3,8 85,4 ± 9,2
Toner 1,7 ± 2,2 0,9 ± 1,1 11,7 ± 4,9 85,7 ± 4,4
Carbon black 1,1 ± 0,8 2,7 ± 2,9 10,1 ± 2,9 86,2 ± 6,2
Die Apoptoseinduktion in den Versuchen mit der Fibroblastenzelllinie 3T3 war bei
den verschiedenen Fasern und Partikeln gering. Sowohl die apoptotischen als auch
die nekrotischen Effekte in den Zellen innerhalb eines Gates waren minimal. Das
Schädigungsmuster der betrachteten Zellen lag insgesamt zwischen 13,1 % und
14,6 %. Die prozentuale Verteilung frühapoptotischer, spätapoptotischer und nekroti-
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