View/Open - JUWEL - Forschungszentrum Jülich

Expansion MNC [-]
112
60
50
40
30
20
10
0
ohne Feeder
Versuch1
Versuch2
Sl/Sl mod
MSC
Feederzelltyp
Abbildung E-25: Expansion der mononukleären Zellen (MNC) aus HSC nach 7-tägiger isolierter
Suspensionskultur (ohne Feeder) bzw. Kokultur mit Sl/Sl mod, MSC, HUVEC oder WJC – Expansionsraten
von Kokulturversuch 1 (schwarze Balken) und 2 (schräg schraffierte Balken), ermittelt anhand
Lebendzellzahlbestimmung in Neubauer-Zählkammer
Um eine Aussage darüber treffen zu können, ob auch die Anzahl der Vorläuferzellen durch
die Kultur vergrößert werden konnte, wurde die Anzahl koloniebildender Zellen im CFC-
Assay ermittelt. Hierbei zeigten die auf primären Feederzellen kultivierten HSC etwas
geringere CFC-Expansion (24- bis 40-fach) als die auf Sl/Sl mod als Positivkontrolle
kultivierten (40- bis 50-fach), jedoch war der Unterschied nicht signifikant (Abbildung E-26).
Die Verteilung der CFC (Abbildung E-27) war für alle als Feederzellen eingesetzten
Primärzellen ähnlich. Im ersten der beiden Kokulturexperimente wurden bei WJC wenige
CFU-GM detektiert, die außer in der Positivkontrolle bei keinem anderen Feederzelltyp
nachgewiesen werden konnten. Beim zweiten Versuch traten im Unterschied zur
Positivkontrolle in keinem der Ansätze mit Primärzellen als Feederzellen CFU-GM auf.
Stattdessen wurden sowohl in der Positivkontrolle als auch bei MSC als Feederzellen
einzelne CFU-GEMM gefunden. In beiden Experimenten war bei der Verwendung von WJC
als Feederzellen die Anzahl der BFU-E etwas geringer als bei den übrigen Feederzellen,
allerdings waren die Unterschiede vor allem im zweiten Kokulturexperiment nur geringfügig.
HUVEC
WJC