View/Open - JUWEL - Forschungszentrum Jülich

Zytokine
Für die Kultur von HSC wurden dem Grundmedium (s. Tabelle M-1) die unten aufgeführten
Zytokine in den dort genannten Konzentrationen hinzugefügt. Alle Zytokine wurden in
trägerfreier Formulierung verwendet. Die Stammlösungen wurden mit einer Konzentration
von jeweils 10 ng/µL in PBS mit 0,5 % HSA angesetzt, sterilfiltriert, zu jeweils 100 µL
aliquotiert und bei –80°C aufbewahrt. Für kurze Fri sten wurden einmal aufgetaute Aliquots
auf 4°C aufbewahrt. Die biologische Funktion der ve rwendeten Zytokine wird im Folgenden
kurz beschrieben.
Stem Cell Factor = SCF (50 ng/mL)
Die Funktionen von SCF in vivo sind, wie in einem Übersichtsartikel von Smith M. A. et al.,
2001, beschrieben wird, vielfältig. Unter anderem wirkt SCF als Wachstumsstimulator und
Apoptose-Suppressor für hämatopoetische Vorläuferzellen, stimuliert die Bildung erythroider
Kolonien und moduliert die Zelladhäsion. In bisher durchgeführten Studien zeigt SCF in
Kombinationen mit anderen Zytokinen ein hohes Potenzial für die ex-vivo-Expansion von
HSC.
Flt3Ligand = Flt3L (50 ng/mL)
Flt3L wird von einer Vielzahl von Geweben exprimiert, unter anderem auch von stromalen
Fibroblasten des Knochenmarks, die die Umgebung für HSC bilden (Übersichtsartikel von
Drexler H. G. und Quentmeier H., 2004). Er beeinflusst die Proliferation, Differenzierung und
das Überleben von hämatopoetischen Stamm- und Vorläuferzellen. Sowohl in vitro als auch
in vivo kann Flt3L für die Expansion von HSC verwendet werden, seine Wirkung ist dabei
jedoch abhängig von Zelltyp und Anwesenheit anderer Wachstumsfaktoren.
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