View/Open - JUWEL - Forschungszentrum Jülich

Zeichen von Seneszenz und hatten lediglich ein Teilungspotenzial von etwa 30 – 40
Zellteilungen. Zwei mittels anderer Vektoren immortalisierte aus Knochenmarkstroma
gewonnene Zelllinien waren dazu in der Lage, die Expansion von Nabelschnurblutzellen
über 4 Wochen aufrechtzuerhalten (Loeuillet C. et al., 2001). Bei der Analyse der
resultierenden Zellen zeigte sich allerdings, dass eine der beiden Zelllinien keine Bildung von
Erythrozyten-Vorläufern mehr zuließ, während beide die Entstehung von Granulozyten- und
Makrophagen-Vorläufern unterstützten. Kürzlich wurden wiederum 3 mit dem SV40-large T-
Antigen immortalisierte Zelllinien beschrieben, von denen 2 aus Knochenmark und 1 aus der
Nabelschnur stammten (De Angeli S. et al., 2004). Die Zelllinien exprimierten
unterschiedliche hämatopoetische Zytokine, und ihr Kulturüberstand steigerte das klonogene
Potenzial von HSC aus Nabelschnurblut in semisolidem Medium. Die direkte Kokultur dieser
Zellinien mit HSC wurde bisher noch nicht untersucht.
Humane Zelllinien sind im Gegensatz zu murinen Zelllinien nicht xenogen, so dass sie
prinzipiell auch für die klinische Anwendung in der HSC-Transplantation geeignet
erscheinen. Allerdings ist ihr schnelles Wachstum und die in vielen Fällen fehlende
Kontaktinhibierung problematisch: da Kokulturen mit höheren Feederzellzahlen als HSC-
Zahlen gestartet werden, könnte es leicht dazu kommen, dass die Feederzellen die
Expansion der HSC nicht unterstützen, sondern durch ihr eigenes starkes Wachstum
verhindern. Daher müssen die Zellen vor der Kokultur wachstumsinhibiert werden. Dies kann
beispielsweise durch Bestrahlung erfolgen, wie bereits für eine andere Zelllinie, die für
Transplantationen eingesetzt werden soll, untersucht wurde (Klingemann H. G. et al., 1996).
Solche Behandlung führt allerdings wiederum teilweise zum Zelltod, und das Vorhandensein
abgestorbener Zellen in der Kultur ist vermutlich nicht günstig für die Expansion von HSC.
Könnte man als Feederzellen Primärzellen verwenden, die noch ihre natürliche
Kontaktinhibition besitzen, würde man dieses Problem umgehen. Verschiedene
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