View/Open - JUWEL - Forschungszentrum Jülich

Bestenfalls ließen sich Feederzellen und HSC aus derselben Nabelschnurblutprobe
gewinnen, was die Abläufe in der Klinik sehr vereinfachen würde. Beide möglichen Quellen
für MSC wurden in die vorliegende Arbeit mit einbezogen.
2.7.2 HUVEC (Human Umbilical Cord Vein Endothelial Cells)
Sucht man nach Feederzellen, die vom selben Spender gewonnen werden können wie die
HSC, bietet sich die Nabelschnur als Quelle dafür an. Ein seit langem in der Forschung
eingesetzter Zelltyp aus der Nabelschnur sind HUVEC, die Endothelzellen, die die
Nabelschnurvene auskleiden. Ihre Isolation wurde erstmals von Jaffe E. A. et al., 1973,
beschrieben. HUVEC wurden dort isoliert, indem die Nabelschnurvene mit Kollagenase
befüllt und die Endothelzellen somit von den Venenwänden abgelöst wurden.
Elektronenmikroskopische Analysen zeigten, dass die so präparierten Endothelzellen die
endotheltypischen Weibel-Palade-Körperchen enthielten und auch sonst Endothelzellen in
situ ähnelten. Diese Eigenschaften blieben über 5 Passagen (3 Monate) erhalten. HUVEC
werden heute in vielen Gebieten der Grundlagenforschung eingesetzt, z.B. für Studien der
Adhäsion von Leukozyten an Endothelien (Springer T. A., 1994) oder Untersuchung der
Vorgänge, die der Atherosklerose zugrunde liegen (Ross R., 1999).
HUVEC produzieren Zytokine, die bei der Regulation der Teilung von HSC eine Rolle
spielen. Im Kulturüberstand von HUVEC wurde neben IL-3 und IL-6 auch SCF
nachgewiesen (Yamaguchi H. et al., 1996). Auch Daten zur Kokultur von HUVEC mit HSC
liegen in der Literatur bereits mehrfach vor. So konnten beispielsweise Jazwiec B. et al.,
1998, zeigen, dass HUVEC die Expansion von mononukleären Zellen und CFU-GM aus
CD34-positiven Zellen aus Nabelschnurblut unterstützten, vor allem, wenn direkter Kontakt
zwischen Feederzellen und HSC möglich war. Durch Zugabe von IL-1α konnte die Fähigkeit
der HUVEC zur Unterstützung der HSC noch gesteigert werden. Feugier P. et al., 2002,
transfektierten HUVEC mit adenoviralen Vektoren, die dazu führten, dass die Zellen
37