„Einfluss der elektrischen Hochfrequenzstimulation des Nucleus ...

Methoden 49
Die Stimulationselektrode wurde mittels Führungskanüle an die richtige
Position im Nucleus caudatus geleitet (AP -0,26mm und ML +3mm relativ zu
Bregma; DV -5mm ausgehend von der Schädeldecke; siehe Abschnitt 2.2),
und so befestigt, dass sie während der Stimulation nicht abfiel. Die
Stimulation fand an allen drei Trainingstagen jeweils nach dem Training,
zwischen 11 und 15 Uhr, statt. Der linke Nucleus caudatus der Ratte wurde
pro Tag vier Mal für 20 Minuten hochfrequent stimuliert.
2.5 Autopsie und Histologie
Während der Experimente zu dieser Arbeit wurden zehn Tiere für die
Histologie verwendet, um die Position der Elektrode im linken Nucleus
caudatus zu kontrollieren. Diese geringe Anzahl an Tieren, die für die
Überprüfung genutzt wurde, kam dadurch zustande, dass neben den
Auswirkungen von striataler HFS auf das Verhalten auch mögliche
Langzeiteffekte der HFS auf Neurotransmitter-Systeme untersucht wurden.
Um bei der NTM-Auswertung ein genaues, aussagekräftiges Ergebnis
erhalten zu können, wurde dafür der größte Teil der Ratten verwendet,
während eine geringere Anzahl an Tieren für die Histologie genügte.
Bei der für die NTM-Analyse (siehe Abschnitt 2.6) notwendigen Autopsie
wurde die Ratte mit CO 2 vergiftet und anschließend dekapitiert. Linker und
rechter Nucleus caudatus des Tieres wurden entnommen und bis zur NTM-
Analyse bei -80°C gelagert. Für die Histologie wurd e die Ratte mit 2ml
Pentobarbital ip euthanasiert und umgehend perfundiert, indem 50ml
Formaldehyd durch die Herzaorta in den Körper des Tieres gegeben und das
Blut somit aus dem Gehirn gespült wurde. Das Hirn wurde entnommen, zwei
Stunden bei 4°C in Formaldehyd gelagert und anschli eßend für 48 Stunden
in Saccharose gelegt. Nach Ablauf dieser Zeit wurde das Hirn mit Hilfe von
-40°C kaltem Isopentan für eine Minute schockgefror en und anschließend
mit einem Cryostat bei -20°C in 40µm dicke Scheiben geschnitten. Diese
Hirnschnitte wurden auf einen Objektträger gegeben und mit der Kresyl-
Violett-Färbung markiert. Anschließend konnte die Position der Elektrode im
linken Nucleus caudatus unter einem Lichtmikroskop kontrolliert werden.