EPIDEMIOLOGIA DE ENFERMEDAD HEMORRAGICA ... - citaREA

Revisión bibliográfica
cuestión (Xu 1990); por este motivo, los órganos con mayor poder hemoaglutinante suelen
ser el hígado, bazo, pulmón, riñones e incluso el suero sanguíneo, seguidos por la tráquea
y de una forma más moderada el corazón, cerebro y nódulos linfáticos mesentéricos
(Pagés 1989; Xu y Chen 1989; Xu 1990). La actividad hemoaglutinante del virus
permanece estable después de tratamientos con éter, cloroformo o calor a 50ºC durante 60
minutos o 56ºC durante 15 minutos. El almacenamiento de los órganos en refrigeración,
incluso durante largos períodos, no reducen significativamente los títulos de HA; sin
embargo, repetidos procesos de congelación y descongelación sí que pueden hacerlos
disminuir o incluso desaparecer (Capucci y cols. 1991).
Aunque la HA ha sido y es ampliamente utilizada, su baja sensibilidad y
especificidad, combinadas con la dificultad de su estandarización y la necesidad de un
aporte constante de eritrocitos tipo O son sus principales inconvenientes. Además se ha
comprobado que la HA en comparación a otras técnicas como la Inmuno
Electromicroscopía o ELISA, produce un 8% de falsos positivos, posiblemente debido a la
presencia de otros agentes hemoaglutinantes como pasterelas y parvovirus, y un 9% de
falsos negativos de los cuales un 4% son debidos a una baja concentración de antígenos.
El restante 5% presumiblemente es debido bien a la proteolisis parcial de la proteína
VP60, la cual tiene lugar sobre todo en animales en los cuales la enfermedad cursa de
forma subaguda o crónica (Capucci y cols. 1991; Capucci y cols. 1996), o bien a la
aparición de formas degradadas de las partículas víricas producidas por una expresión
defectuosa de su genoma, o a una delección de parte del mismo, fenómeno que tiene lugar
con marcada intensidad en los casos en que la enfermedad es de curso crónico (Granzow y
cols. 1996), dando lugar a partículas de menor tamaño y no hemoaglutinantes.
Posteriormente, las limitaciones de esta técnica han sido más evidentes al
confirmarse la existencia de cepas patógenas de virus VHD no hemoaglutinantes, o que
son hemoaglutinantes únicamente a temperaturas próximas a 4ºC. (Capucci y cols. 1996;
Kesy y cols. 1996). Por este motivo, se recomienda que para el diagnóstico de la
enfermedad se analicen varios animales y a ser posible se utilicen otras técnicas
simultáneamente como ELISA o ME (Chasey y cols. 1995).
De la técnica ELISA para la detección de antígenos se han puesto a punto varios
tests, todos ellos basados en el método sandwich, que difieren básicamente en el sistema
enzimático utilizado y en el tipo de agentes inmunológicos utilizados como reactivos. En
todos los casos, un suero hiperinmune de conejo anti-VHD es directamente adsorbido a la
fase sólida, mientras los trazadores elegidos varían (suero de hámster hiperinmune o IgG
purificadas de conejo par evitar otras reacciones no específicas a VHD). La técnica de
ELISA es una prueba con mayor sensibilidad y especificidad que la HA, ya que es capaz
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