EPIDEMIOLOGIA DE ENFERMEDAD HEMORRAGICA ... - citaREA

Revisión bibliográfica
de detectar el antígeno a pesar de la degradación proteolítica que lo hace indetectable a la
HA, siendo capaz además, de diferenciar, mediante anticuerpos monoclonales, los agentes
etiológicos de la VHD y la EBHS (Capucci y cols. 1991), así como de detectar las
variantes no hemoaglutinantes.
La Microscopía Electrónica (ME) permite también el diagnóstico de la VHD
mediante la visualización del agente etiológico, de morfología muy determinada, siendo
encontrado normalmente en el citoplasma de los hepatocitos y en los neumocitos tipo I
(Xu y cols. 1985).
Una variante de la técnica anterior es la Inmunoelectromicroscopía (IME), descrita
por Smid y cols. (1989). Este método emplea un suero de conejo hiperinmune, cuya
reacción agrupa las partículas víricas y las hace más fácilmente visibles al microscopio
electrónico. La IME es superior en sensibilidad y especificidad a la HA y muy similar a
ELISA, siendo sus mayores inconvenientes la gran inversión de tiempo y el elevado coste
de procesamiento de cada muestra (Capucci y cols. 1991).
Otras técnicas ensayadas para la detección del antígeno son el test de aglutinación
en látex y la inmunoelectromicroscopía en fase sólida (Marcato y cols. 1989), el test de
coaglutinación de la proteína estafilocócica A (Peshev y cols. 1996), o la
inmunoperoxidasa y técnicas de PCR (Gould y cols. 1997) utilizadas únicamente a nivel
experimental.
Para la valoración del nivel de anticuerpos anti-VHD, la prueba de la Inhibición de
la Hemoaglutinación (IHA) fue el primer test realizado (Pu y cols. 1985). Esta prueba, a
pesar de las gran inversión de tiempo necesaria, lo que limita el número de muestras que
pueden ser analizadas, sigue siendo la preferida por numerosos laboratorios por su relativa
sencillez y asequibilidad de los reactivos utilizados (Capucci y cols. 1991). Sin embargo,
la negatividad serológica a este test no parece ser concluyente de la susceptibilidad de los
conejos a la VHD (Pagés 1990), por lo que en la actualidad se tiende al diagnóstico con
técnicas ELISA.
La técnica ELISA para la detección del anticuerpos anti-VHD cuenta con varios
protocolos que pueden ser subdivididos en dos grupos: ELISA con reacción por
competición y ELISA de reacción indirecta. En términos de capacidad para revelar la
mínima cantidad de anticuerpos específicos ambos protocolos son similares, sin embargo
con respecto a la especificidad, el método de reacción indirecta es más susceptible a
errores, ya que no es capaz de distinguir la presencia de diferentes serotipos, por lo que la
reacción por competición es más deseable cuando la especificidad es primordial (Capucci
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