Las tesinas - Universidad de Belgrano

Tesinas Identificación y cuantificación de polifenoles en yerba mate y brebajes
Cuadro 5.5.Cuadro comparativo de compuestos polifenólicos (mgGAE/porción) determinados en *Brebajes preparados con
yerba mate con palo. (a) Mate cocido preparado con 20 g de yerba mate con palo con 245 ml de agua en ebullición lo que
representa una infusión de 1 taza. (b) Mate caliente preparado con 20 g yerba mate con palo con agua a 80°. (c) Mate tereré
preparado con 20 g de yerba mate con palo con agua a 3°C. (d) Mate cocido en saquito que contiene 3g de yerba mate
preparado con 250 ml de agua a ebullición (e) Mate chimarrao preparado con 85 g de yerba mate nativa con agua a 75°C. (f)
Mate chimarrao preparado con 85 g de yerba mate tradicional con agua a 75°C. (g) Mate chimarrao preparado con 85 g de
yerba mate smooth con agua a 75°C. (h) Mate tereré preparado con 50 g de yerba mate tereré con agua a 10°C. * Vol. Extracto:
representa el volumen obtenido para 6 “mates” en el caso del trabajo presente y 10 volumenes en el caso de “mates” según
Meinhardt et al. (2009)
6.- Cuantificación de compuestos fenólicos mayoritarios: Método
cromatográfico HPLC
6.1- Introducción:
Para conocer la identidad y cantidad de los compuestos polifenólicos mayoritarios, se analizaron las
mismas muestras vegetales y los brebajes obtenidos con yerba mate por cromatografía líquida de alta
performance (HPLC).
Mediante el empleo de HPLC, se pueden determinar un gran número de polifenoles de interés, como
ácidos cafeoilquínicos y flavonoides presentes en yerba mate, utilizando un sistema adecuado para lograr
la separación de los mismos, acoplado a un detector UV/Vis de fotodiodos y un correcto método de
extracción para la posterior valoración.
Los ácidos cafeoilquínicos y el ácido cafeico se identificaron por coincidencia de sus tiempos de
retención y espectros UV con sustancias de referencia. La cuantificación se realizó a una longitud de
onda de 325 nm que es el máximo de absorbancia para éstos compuestos. Cabe destacar que en el
cromatograma correspondiente a Yerba mate, Ilex paraguariensis y sus brebajes se detectan tres picos
correspondientes al ácido clorogénico (ácido 3-O-cafeoilquínico) y sus isómeros, ácido criptoclorogénico
(Acido 4-O-cafeoilquínico) y ácido neoclorogénico (Acido 5-O-cafeoilquínico), conocidos genéricamente
como ácidos clorogénicos. Estos compuestos se valoraron como ácido clorogénico ya que no se dispone
de todos los testigos, pero se pueden identificar por su espectro de UV. Por otra parte, al ser isómeros
de posición, su absortividad es muy semejante como así también su máximo de absorbancia. Además
del ácido clorogénico y sus isómeros también se pueden ver tres picos más, con un tiempo de retención
40