Las tesinas - Universidad de Belgrano

Tesinas Identificación y cuantificación de polifenoles en yerba mate y brebajes
l Temperatura del horno: 24C
l Volumen de inyección: 20 μl
l Programa de elución:
6.3 Preparación de las soluciones:
6.3.1- Fase Móvil:
Solución A: Medir exactamente 0,1 ml de ácido fosfórico y colocar en matraz de 100 ml.
Llevar a volumen con agua calidad HPLC.
Solución B: Medir exactamente 0,1 ml de ácido fosfórico y colocar en un matraz de 100 ml.
Llevar a volumen con acetonitrilo calidad HPLC.
6.3.2- Solución testigo:
Se prepararon soluciones testigo de Ácido clorogénico, Rutina y Ácido cafeico de una concentración
de 0,1mg/ml de cada sustancia de referencia. La solución de ácido cafeico de 0,1 mg/ml se diluyó para
obtener una concentración de 0.01 mg/ml. Se tomaron 4 ml, 0,5 ml y 1 ml de cada solución respectivamente
y se transfirió a un matraz de 10 ml y se llevó a volumen con agua. Se obtuvo una concentración
final aproximada entre 0.05 mg/ml, 0.005 mg/ml y 0,0001 mg/ml respectivamente.
6.3.3- Muestras vegetales y brebajes:
6.3.3.1 Muestras vegetales
Los extractos fueron preparados pesando exactamente alrededor de 5 g de cada muestra vegetal (en
este caso Ilex paraguariensis, yerba mate con palo y yerba mate sin palo comercial), las cuales fueron
sometidas a sonicación con 100 ml de MeOH a temperatura ambiente por 20 minutos. Luego de este
período se filtraron los extractos. El marco de las filtraciones fue sometido nuevamente a sonicación con
100 ml de MeOH a temperatura ambiente por otros 20 minutos. Los dos extractos metanólicos obtenidos
para cada muestra vegetal se colocaron en un matraz aforado de 250 ml y se llevaron a volumen con el
mismo solvente.
Se tomó 1ml de cada uno de estos extractos y se colocó en un matraz aforado de 10 ml, y se llevó a
volumen con una solución de MeOH: H2O (50:50).
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