PesquisaSEXAGEM DE EMBRIÕES BOVINOSAtualidades sobre a aplicação da técnica de Sexagem aliada ao PCR (Polymerase Chain Reaction), desde o campo até a comercialização de embriões sexados.Fotografias e ilustrações cedidas pelos autoressexagem de embriões poranálise de DNA, agregada àprodução in vitro, constituemferramentas importantes que permitemintensificar e acelerar o melhoramentogenético de animais de alto valorzootécnico. Através destas tecnologiaso criador pode escolher o sexodesejado ainda na fase embrionária,estudadas há mais de 25 anos e areação em cadeia da polimerase(PCR) reproduz artificialmente a formacomo o DNA é replicado na natureza(HASLER et al, 2002). Apresentadaà comunidade científica em1984, a PCR foi adotada como umaferramenta de pesquisa essencialdado à potencialidade de utilizaçãona área de biologia molecular (OLI-VEIRA; HENKES, 2002).A sexagem de Embriões Bovinospela técnica de PCR (do inglês PolymeraseChain Reaction) é uma biotecnologiarelacionada à transferênciade embriões (REICHENBACH etal., 2001), que contribui diretamentena otimização da eficiência reprodutivapara a melhora da performanceprodutiva e da lucratividade dosrebanhos bovinos (SCARCELLI et al,2004).COLHEITA DE OÓCITOSPAOLA GOMES PASSAGLIA – BIÓLOGA– CENTRO DE ENSINO SUPERIOR DEUBERABA – paolapassaglia@hotmail.comANTONIO HAMILTON CHAVES –DOUTOR EM ZOOTECNIA – PROFESSORDO CENTRO FEDERAL DE EDUCAÇÃOTECNOLÓGICA DE UBERABAahchaves@terra.com.brFigura 1: Colheita de oócitosFonte: Gonçalves, 2001diminuindo custos com receptoras, tratamentoshormonais para sincronização,manejo e locação de espaço napropriedade. O Brasil tem se destacadocomo um dos países que mais aplicacomercialmente e em larga escalaas diversas biotecnologias utilizadas nareprodução animal.As técnicas para a determinação dosexo em embriões bovinos têm sidoO primeiro passo é a colheita in vitrode oócitos, geralmente é efetuadapor punção folicular, utilizandoagulha acoplada a uma seringa oubomba a vácuo, guiada por ultrasonografiatransvaginal (GONÇAL-VES et al., 2002), este método decolheita por ser não-cirúrgico temmostrado praticidade na utilização repetidada mesma doadora (HAFEZ,1995).A punção folicular transvaginal contribuipara reduzir o intervalo entregerações, para acelerar o melhoramentogenético, bem como podeser repetida em várias oportunidadesnum mesmo animal sem prejuízode sua capacidade reprodutiva30 <strong>Biotecnologia</strong> Ciência & <strong>Desenvolvimento</strong> - nº <strong>37</strong>
oócito e melhora o posterior desenvolvimentoembrionário.Além do meio, outros fatores relacionadoscom o ambiente de cultivo celulardevem ser considerados comofundamentais. Geralmente, a maturaçãode oócitos bovino é realizada a<strong>37</strong>,8 o C por 24 horas em atmosfera de5% de CO2 em ar e umidade saturada(GONÇALVES; 2002).FECUNDAÇÃO IN VITROFigura 2: oócito maturadoFonte: Folheto de divulgação do CongressoBrasileiro de Reprodução Animal, 2006(PIETERSE et al., 1991).Com o desenvolvimento de técnicasde reprodução assistida em animais,ocorreu um grande avanço naotimização e multiplicação de fêmeasde interesse para a produçãoanimal.A aspiração de ovócitos imaturospor punção folicular, associada à maturaçãoe fecundação “in vitro” dosmesmos, e ao cultivo “in vitro” dosembriões, permite que sejam produzidas,em média, 36 crias/anode uma única fêmea. (RUMPF,2006).a maturação (GONÇALVES et al,2002).Também é usual a utilização do LH,ou do hormônio folículo estimulante(FSH) ou ainda a combinação dessasgonadotrofinas. A maioria dos resultadospublicados demonstra que a adiçãode gonadotrofinas ao meio dematuração de oócitos bovinos, aumentaa capacidade de fecundação doA FIV também é uma técnica fundamentalpara o uso de todas as novasbiotécnicas da reprodução animal, poisatravés dela é possível produzir embriõespró-sexados e embriões ou zigotosem vários estágios de desenvolvimento,para os estudos de transgênesee clonagem. Recentemente,também tem sido sugerido o uso daFIV para avaliar o potencial reprodutivode touros, avaliando com maisprecisão a fertilidade de um reprodutor(DODE, 2000).As técnicas mais utilizadas para separaçãode espermatozóides vivos dosdemais componentes do sêmen e doscrioprotetores são o swim up, o gradientede percoll e o lavado espermático.A técnica ideal para separaçãoespermática deve ser rápida, simples,de baixo custo, capaz de recuperara maioria dos espermatozóidesmóveis, não resultar em alterações espermáticas,remover espermatozóidesmortos e outras células, incluindo mi-MATURAÇÃO IN VITROA maturação dos oócitos (Figura 2),envolve as transformações nucleare citoplasmática, e está ligada a umasérie de mudanças estruturais e bioquímicasque tornam o gameta femininoapto a ser fecundado e terdesenvolvimento embrionário subseqüente..O oócito presente nofolículo primordial, uma vez ativado,deve crescer e sofrer várias modificaçõesde ordem ultra-estrutural,citoplasmática e bioquímicacom a finalidade de se tornar competentepara reiniciar e completarFigura 3: Células (em estágiode clivagem) de embriõesbovinos cultivados .in vitro. -Foto de divulgação do cursode Fecundação in vitro daUniversidade Federal dePelotas, 2006Figura 4: Sistema de micromanipulaçãocompostopor microscópio invertido,2 microseringas para a aspiraçãoe 2 micromanipuladoresmecânicos (GAR-CIA; UVO, 2002)<strong>Biotecnologia</strong> Ciência & <strong>Desenvolvimento</strong> - nº <strong>37</strong> 31
- Page 1 and 2: Biotecnologia Ciência & Desenvolvi
- Page 3 and 4: BC&D - Como o senhor avalia aposiç
- Page 5 and 6: dicamentos.Os anticorpos monoclonai
- Page 8 and 9: PesquisaLUCIFERASES DE VAGALUMESPes
- Page 10 and 11: ger & McElroy, 1965; Hastings,1995)
- Page 12 and 13: ciferases de elaterídeos e fengod
- Page 14 and 15: utilizados como marcadores sensíve
- Page 16: 5,5-dimethyloxyluciferin. JACS 124:
- Page 19 and 20: Rev. Bras. Entom. 33: 359-366..Vivi
- Page 21 and 22: vimento de pesquisas científicas (
- Page 23 and 24: ubíquos) é inferior a 100, envolv
- Page 25 and 26: (tais como genes, operons, grupos[c
- Page 27 and 28: evolution of mycobacterialpathogeni
- Page 29: GLOSSÁRIOAlgoritmo. Procedimento o
- Page 33 and 34: Figura 7: Ilustração de resultado
- Page 35 and 36: 10. COELHO, L. A.; ESPER, C. R.;GAR
- Page 37 and 38: - permitir a rápida liberação do
- Page 39 and 40: de crescimento, quatro grupos de mi
- Page 41 and 42: skovia xanthineolytica LL-G109 (And
- Page 43 and 44: Tabela 1. Purificação da β-1,3 g
- Page 45 and 46: depende em parte, da venda dos subp
- Page 47 and 48: tipo poro-canal-G1pF atua por sensi
- Page 49 and 50: eutilização de células imobiliza
- Page 51 and 52: ANP - AGENCIA NACIONAL DE PETROLEO
- Page 53 and 54: inantes, incluindo eritropoetinas,
- Page 55 and 56: proteínas terapêuticas como, por
- Page 57 and 58: capsuladas, a redução de efeitos
- Page 59 and 60: Zhang W, Rong Z, Chen H, Jiang X.Br
- Page 61 and 62: FIGURA 1. Estrutura “Markush”Ma
- Page 63 and 64: Figura 2, todos os compostos origin
- Page 65 and 66: Figura 2. O filo Porifera é dividi
- Page 67 and 68: Figura 4. Microscopia eletrônica d
- Page 69 and 70: plication of genomics to uncultured
- Page 71 and 72: viabilidade celular (1) a técnica
- Page 73 and 74: Gráfico 02: Média das viabilidade
- Page 75 and 76: Tabela 04: Análise das médias de
- Page 77 and 78: icus blazei. Atualmente é também
- Page 79: 5. Agaricus sylvaticus é sinônimo