Biotecnologia Ciência & Desenvolvimento - nº 37 1

o H 3PO 4restrito pelo alto custo. Durante aacidulação, forma-se certa quantidade desal (reação do ácido inorgânico com íon dosabão) que se deposita na fase inferior deum líquido de três fases, estando a fase superiorconstituída pelos ácidos graxos livres,e a fase intermédia composta principalmentepor glicerol e álcool (Figura 2b).O glicerol recuperado alcança concentraçõessuperiores a 80 % (p/p), com quantidadesvariáveis de água, corantes e álcool.Posteriormente, o glicerol com excesso deácido é neutralizado com solução de NaOHe submetido a tratamento térmico (70 o C)para eliminar os componentes voláteis (recuperaçãode álcool)(OOI et al., 2004;FUKUDA, KONDO, NODA, 2001). Nestaforma, parcialmente livre de impurezas, oglicerol pode ser utilizado como substratode fermentação por várias espécies de microrganismos.As características físicas, químicas e nutricionaisdo glicerol bruto dependem do tipode ácido graxo (gordura animal ou óleovegetal) e do tipo de catálise empregadana produção de biodiesel. No entanto, aprocura pela glicerina purificada é muitomaior, devida ao seu valor econômico. Aaplicação do glicerol na indústria está condicionadaao grau de pureza, que deve serigual ou superior a 95%. Para obter graude pureza superior a 95% (p/p)(grau alimentícioou farmacêutico), o glicerol deveser submetido a destilação, mas sob custoelevado .Por outro lado, de acordo com a Tabela 2,o glicerol bruto contém elementos nutricionais,como, fósforo, enxofre, magnésio,cálcio, nitrogênio e sódio, e que são factíveisde serem utilizados por microrganismospara o seu crescimento durante processosfermentativos (THOMPSON, HE,2006).ASSIMILAÇÃO, METABOLISMO ECONVERSÃO MICROBIOLÓGICA DOGLICEROL.O glicerol é considerado uma fonte de carbonoaltamente reduzida e assimilável porbactérias e leveduras sob condições aeróbicase anaeróbicas 19 para a obtenção deenergia metabólica, como regulador do potencialredox e para a reciclagem de fosfatoinorgânico dentro da célula (DILLIS etal., 1980).Vários estudos foram desenvolvidos visandoa utilização de glicerol como fonte decarbono por microrganismos, especialmentepor bactérias. Muitos deles apontam principalmentea mecanismos de assimilação deglicerol por estes microrganismos para aprodução de compostos intermediários depolímeros, resinas e aditivos para combustíveis(PAPANIKOLAOU et al., 2002; ITOet al., 2005; CHENG et al 2007).O transporte do glicerol através da membranacelular constitui a primeira etapa parao seu metabolismo. De uma forma geral, aassimilação de glicerol por parte dos microrganismosenvolve o transporte passivo(GANCEDO, GANCEDO, 1968) e transporteativo (LAGES, SILVA-GRAÇA, LUCAS, 1999)através da membrana plasmática.O transporte passivo inclui a difusão simples(permeação não específica) e a difusãofacilitada mediada por proteínas localizadasnas camadas mais internas da membranaplasmática (MIP), as permeases. Adifusão simples, sendo ATP não dependente,requer um gradiente de concentraçãopara o transporte do substrato através damembrana. Conseqüentemente, a concentraçãodo substrato no interior da célula nãoFigura 2.(b)- Separação do glicerol apóstratamento com ácido concentrado,a fase superior corresponde aácidos graxos, fase intermédia:glicerol, fase inferior: glicerol + saisFigura 2.(a) - Fluxograma de produção de biodiesel e tratamento de purificação do glicerolsupera aquela encontrada no meio decultura(MOAT, FOSTER, SPECTOR, 2002).Na levedura Saccharomyces cerevisiae, estudosdesenvolvidos por Luyten et al.(1995), assinalaram a existência de permeasesFPS1, específicas para transporte deglicerol (Figura 3).O glicerol é um dos poucos substratos queatravessa a membrana celular por difusãofacilitada nas células procarióticas. Em bactériascomo Escherichia coli, a proteína do46 Biotecnologia Ciência & Desenvolvimento - nº 37