Biotecnologia Ciência & Desenvolvimento - nº 37 1

oócito e melhora o posterior desenvolvimentoembrionário.Além do meio, outros fatores relacionadoscom o ambiente de cultivo celulardevem ser considerados comofundamentais. Geralmente, a maturaçãode oócitos bovino é realizada a37,8 o C por 24 horas em atmosfera de5% de CO2 em ar e umidade saturada(GONÇALVES; 2002).FECUNDAÇÃO IN VITROFigura 2: oócito maturadoFonte: Folheto de divulgação do CongressoBrasileiro de Reprodução Animal, 2006(PIETERSE et al., 1991).Com o desenvolvimento de técnicasde reprodução assistida em animais,ocorreu um grande avanço naotimização e multiplicação de fêmeasde interesse para a produçãoanimal.A aspiração de ovócitos imaturospor punção folicular, associada à maturaçãoe fecundação “in vitro” dosmesmos, e ao cultivo “in vitro” dosembriões, permite que sejam produzidas,em média, 36 crias/anode uma única fêmea. (RUMPF,2006).a maturação (GONÇALVES et al,2002).Também é usual a utilização do LH,ou do hormônio folículo estimulante(FSH) ou ainda a combinação dessasgonadotrofinas. A maioria dos resultadospublicados demonstra que a adiçãode gonadotrofinas ao meio dematuração de oócitos bovinos, aumentaa capacidade de fecundação doA FIV também é uma técnica fundamentalpara o uso de todas as novasbiotécnicas da reprodução animal, poisatravés dela é possível produzir embriõespró-sexados e embriões ou zigotosem vários estágios de desenvolvimento,para os estudos de transgênesee clonagem. Recentemente,também tem sido sugerido o uso daFIV para avaliar o potencial reprodutivode touros, avaliando com maisprecisão a fertilidade de um reprodutor(DODE, 2000).As técnicas mais utilizadas para separaçãode espermatozóides vivos dosdemais componentes do sêmen e doscrioprotetores são o swim up, o gradientede percoll e o lavado espermático.A técnica ideal para separaçãoespermática deve ser rápida, simples,de baixo custo, capaz de recuperara maioria dos espermatozóidesmóveis, não resultar em alterações espermáticas,remover espermatozóidesmortos e outras células, incluindo mi-MATURAÇÃO IN VITROA maturação dos oócitos (Figura 2),envolve as transformações nucleare citoplasmática, e está ligada a umasérie de mudanças estruturais e bioquímicasque tornam o gameta femininoapto a ser fecundado e terdesenvolvimento embrionário subseqüente..O oócito presente nofolículo primordial, uma vez ativado,deve crescer e sofrer várias modificaçõesde ordem ultra-estrutural,citoplasmática e bioquímicacom a finalidade de se tornar competentepara reiniciar e completarFigura 3: Células (em estágiode clivagem) de embriõesbovinos cultivados .in vitro. -Foto de divulgação do cursode Fecundação in vitro daUniversidade Federal dePelotas, 2006Figura 4: Sistema de micromanipulaçãocompostopor microscópio invertido,2 microseringas para a aspiraçãoe 2 micromanipuladoresmecânicos (GAR-CIA; UVO, 2002)Biotecnologia Ciência & Desenvolvimento - nº 37 31