Promotion Wiebke Winkens Abgabeversion 2 - RWTH

Diskussion
Dabei ist die Interaktion zwischen den Frizzled-Rezeptoren und den WNT-Liganden
bislang nicht vollständig geklärt. So beschreiben Rawadi und Mitarbeiter, dass eine
Überexpression von murinem Frizzeld1 eine Repression des WNT/ß-Catenin
kanonischen Signalweges induziert (Roman-Roman et al., 2004).
Wie schon zuvor beschrieben, sind die SFRPs, als direkten WNT-Antagonisten, in 70%
der Mammakarzinomen im Vergleich zu Brustnormalgewebe runterreguliert (Klopocki
et al., 2004). Dies impliziert, dass beim Brustkrebs eine Deregulation des WNT-
Signalweges bereits schon auf der Rezeptor-Liganden-Ebene eine Rolle spielt.
Daher wurde in der vorliegenden Arbeit untersucht, ob eine differentielle Expression
der Frizzled-Rezeptoren im Mammakarzinom im Vergleich zu Brustnormalgewebe
vorliegt. Insgesamt gibt es in der Literatur bislang nur wenige Veröffentlichungen über
die Frizzled-Rezeptoren im Mammakarzinom. Milovanovic et al. zeigten mittels eines
polyklonalen Antikörpers gegen FZD1 und FZD2 in immunhistochemischen
Untersuchungen an normalen Brustdrüsengewebe und invasiv duktalen Karzinomen,
dass im Normalgewebe eine geringe Expression nachweisbar war, die in 80% der
untersuchten invasiv duktalen Karzinomen weiter herabreguliert war (Milovanovic et al,
2004).
Als ersten Schritt wurde in der vorliegenden Arbeit die Expression der
Frizzled-Rezeptoren im Brustnormalgewebe auf mRNA-Ebene mittels Real-Time-RT-
PCR in einer kommerziell erhältlichen cDNA der Firma Clontech untersucht. Hier
zeigten FZD1, FZD4, FZD6 und FZD10 eine starke Expression auf mRNA-Ebene,
während die restlichen Frizzled-Rezeptoren im Vergleich zur Referenz GAPDH nur
eine geringe Expression zeigten. Im weiteren Verlauf standen die vier Frizzled-
Moleküle im Fokus der Analyse, die im Normalgewebe eine starke mRNA-Expression
zeigten, unter der Annahme, dass diese bei der Entstehung von Brustkrebs durch
Deregulation eine Rolle spielen könnten.
Die vier auf mRNA-Ebene stark exprimierten Frizzled-Gene (FZD1, FZD4, FZD6 und
FZD10) wurden dann auf einem Kollektiv von 16 Normalgeweben und 25
Tumorgeweben weiter untersucht. Hierbei zeigte sich auf mRNA-Ebene bei allen vier
untersuchten Frizzled-Rezeptoren keine differentielle Expression, weder zwischen den
Normal- und Tumorgeweben, noch zwischen den Tumoren mit und ohne
Lymphknotenmetastasen.
Weitere Untersuchungen auf Protein-Ebene sind für die Zukunft für ein genaues
Verständnis notwendig, insbesondere in Zusammenschau mit der Tatsache, dass die
SFRPs als direkte Antagonisten stark differentiell exprimiert sind. Weiterhin bestehen
51