Promotion Wiebke Winkens Abgabeversion 2 - RWTH

Diskussion
In den durchgeführten Untersuchungen zeigte sich, dass die beiden untersuchten WNT-
Mitglieder WNT2b und WNT7a in normalem Ovargewebe exprimiert sind. Im
Folgenden werden die beiden WNT-Moleküle getrennt diskutiert.
5.3.1 WNT2b-Expression im Ovarialkarzinom
Im Vergleich zum Ovarnormalgewebe zeigte sich für WNT2b eine signifikante
(p=0,0024) Herabregulation auf RNA-Ebene im Ovarialkarzinomgewebe im Vergleich
zum untersuchten Ovarnormalgewebe. Weiterhin zeigte sich ein nicht signifikanter
Trend, dass die Expression beim Vergleich der primären Tumore zu den
Lymphknotenmetastasen, den Peritonealmetastase und den Rezidivtumoren weiter
abnimmt.
Allerdings weist WNT2b auch im hier untersuchten Normalgewebe eine große
Variabilität der Expressionsstärke auf. Dabei zeigt sich aber, dass die Expression in den
beiden untersuchten Proben, die als Zystadenomen klassifiziert wurden (Ov1217 und
Ov1263), deutlich geringer ist als in den restlichen Normalgeweben.
Bei den untersuchten Proben handelt es sich um Laser-mikrodissezierte Proben, so dass
in allen Proben ein vergleichbarer Epithelanteil vorliegt. Insgesamt legen diese
Ergebnisse die Schlussfolgerung nahe, dass eine WNT2b Herunterregulation eine frühe
Modifikation in der Kanzerogenese ist. Nachdem eine Herabregulation von WNT2b auf
RNA-Ebene gezeigt werden konnte, sollte der molekulare Mechanismus für dieses
tumorassoziierte gene-silencing identifiziert werden. Ein möglicher Mechanismus die
Herabregulation von WNT2b zu erklären, wäre eine Methylierung der Promotersequenz
des WNT2b-Genes und eine dadurch verringerte Transkription. In dem Bereich bis
1000 Basenpaare aufwärts des ersten kodierenden Exons von WNT2b lässt sich ein
CpG-reicher Sequenzabschnitt nachweisen (CpG-Insel). Eine CpG-Methylierung in
diesem für die Transkription potenziell regulatorisch wichtigen Bereich könnte zu einer
Repression der WNT2b-Expression führen.
Nicht veröffentlichte Ergebnisse unserer Arbeitsgruppe zeigen, dass die WNT2b
Expression von Zelllinien nach einer in-vitro Demethylierung deutlich ansteigt. Dies
lässt vermuten, dass die WNT2b-Expression tatsächlich über Methylierung reguliert
wird.
In dem untersuchten Kollektiv zeigten alle untersuchten Normalgewebe und
Tumorgewebe eine Methylierung im untersuchten Bereich. Dies widerspricht der
Erwartungshaltung, dass die Transkription des Genes über Methylierung
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