Promotion Wiebke Winkens Abgabeversion 2 - RWTH

Diskussion
herunterreguliert wird, denn in diesem Fall wäre eine Methylierung im Tumorgewebe
und ein unmethylierter Status im Normalgewebe zu erwarten.
Dies könnte darin begründet sein, dass nicht der Bereich des Promoters untersucht
wurde, der für die Regulation der Transkription entscheidend ist. Eine weitere
Erklärungsmöglichkeit besteht darin, dass es sich bei den untersuchten Normalgewebe
nach anatomisch-histologischen Kriterien nicht um eindeutige Ovarnormalgewebe
handelte, sondern auch gutartige, zystische Läsionen des Ovars mit untersucht wurden.
Bei den durchgeführten Untersuchungen auf mRNA-Ebene zeigte sich schon eine
Herunterregulation in benignen Tumoren, daher könnte auch in begingen Tumoren eine
Methylierung der untersuchten Sequenz vorliegen und dies zu dem oben geschilderten
Ergebnis geführt haben. Für die Zukunft sollten weitere Untersuchungen durchgeführt
werden, um diese Hypothese zu belegen. Weiterhin waren die hier untersuchten Proben
nicht mikrodisseziert. In den Untersuchungen auf RNA-Ebene an mikrodissezierten
Gewebeproben mit vergleichbarem, hohem Epithelanteil waren Einflüsse durch
umgebendes Stroma nahezu ausgeschlossen. Es könnte sein, dass die untersuchte Gen-
Sequenz in Zellen im umgebenden ovariellen Stroma immer methyliert vorliegt.
Dadurch, dass die untersuchten Proben in dem Kollektiv, das auf Methylierung
untersucht wurde nicht mikrodisseziert waren, könnte die hier gemessene Methylierung
durch umgebende Stromazellen hervorgerufen sein und nicht durch die Epithelien, die
aber die entscheidenden Zellen bei der Entartung sind. Außerdem kann eine komplexe
Regulation durch alternative Promotoren nicht ausgeschlossen werden.
Zusammenfassend führen die Ergebnisse der Arbeit in Zusammenschau mit den oben
beschriebenen in-vitro Demethylierungsversuchen an Zelllinien zu der Hypothese, dass
eine Herunterregulation von WNT2b ein früher Schritt in der Tumorgenese des serösen
Ovarialkarzinoms sein könnte und die differentielle Expression durch eine differentielle
Methylierung hervorgerufen werden könnte. Für die Zukunft wäre es interessant
weiterführende Analysen an einem größeren, gut klassifizierten Kollektiv aus
Ovarnormalgeweben, gutartigen Ovartumoren und malignen Ovarialkarzinomen
durchzuführen, um die Ergebnisse zu verifizieren. Vor allem sollte eine Analyse auf
Protein-Ebene erfolgen, um zu überprüfen, ob auch hier eine differentielle Expression
von WNT2b vorliegt. Bezüglich der Frage, ob die differentielle Expression auf mRNA-
Ebene durch eine differentielle Methylierung hervorgerufen wird, wäre es für die
Zukunft sinnvoll, den Promoter-Bereich von WNT2b weiter zu analysieren um die für
die Regulation der Transkription wichtigen Bereiche (zum Beispiel: Bindungsstellen für
Transkriptionsfaktoren) darstellen zu können und dann diese auf differentielle
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