Il Grifone in Italia WORKSHOP IL GRIFONE IN ITALIA - Acalandrostour

(Eppendorf, Milano). Nel test viene regolarmente incluso un controllo negativo per escludere
contaminazioni da DNA esogeno, in quanto il gene CHD-1 è presente anche nell’uomo. Il
prodotto di amplificazione viene quindi analizzato su gel di agarosio al 3% e l’immagine
acquisita con il sistema GelDoc 2000 (Bio Rad, Milano). La determinazione del sesso viene
realizzata mediante lettura con evidenziazione di due bande (frammenti di amplificazione),
nei soggetti femminili, e di una banda, nei soggetti maschili, con dimensioni che variavano
dalle 250 alle 420 paia di basi a seconda della specie. (Guaricci et al., 2005; Costantini et al.,
2006a; Costantini et al., 2008a) (Fig.1).
Fig.1- PCR (DNA) da piuma in Capovaccaio (Neophronpercnopterus): separazione su gel di
agarosio degli amplificati. Sono indicati i codici di identificazione individuale (anelli) ed i relativi
sessi evidenziati con F (due bande) ed M (una banda).
Per le specie non responsive, come rapaci diurni e notturni, ed alcuni avvoltoi, come il Grifone
(Gyps fulvus), è stata definita una metodica alternativa di sessaggio genetico, la PCR-RFLP,
da DNA estratto da piuma e, nell’ambito di ricerche preliminari in specie modello, come la
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