Il Grifone in Italia WORKSHOP IL GRIFONE IN ITALIA - Acalandrostour

Con l’enzima HaeIII possono essere sessati, mediante PCR-RFLP, ad esempio, esemplari
di Aquila reale (Aquila chrysaetos), Aquila rapace (Aquila rapax rapax), Aquila di mare
codabianca (Haliaeetus albicilla albicilla), Gufo reale (Bubo bubo), Gufo comune (Asio
otus), Gufo della Virginia (Bubo virginianus subarticus), Poiana di Harris (Parabuteo
unicinctus) e Nibbio reale (Milvus milvus), mentre con l’enzima Asp700 possono essere
sessati soggetti di Civetta (Athene noctua) e di Grillaio (Falco naumanni). In indagini
preliminari sulla comparazione di metodiche di sessaggio genetico da piuma negli Avvoltoi,
il Capovaccaio (n=15) (Costantini et al., 2009b,c), l’Avvoltoio papa (Sarcorhamphus papa)
(n=2) e l’Avvoltoio delle palme (Gypohierax angolensis) (n=19) sono risultati responsivi alla
metodica di base (PCR), mentre l’Avvoltoio calvo (Sarcogyps calvus) (n=5) ed il Grifone
(Gyps fulvus) (n=15) sono risultati sensibili alla metodica PCR-RFLP (HaeIII e Asp700),
anche da campioni conservati a temperatura di congelamento.
Nel corso dei protocolli specie-specifici di ricerca per la definizione e la validazione delle
metodiche genetiche di sessaggio da piuma, preliminari e propedeutici all’applicazione in
campo, per tutti gli individui (Gruppi Controllo) c’è stata concordanza tra i risultati relativi
al sesso determinato mediante l’amplificazione del DNA e le peculiarità morfofunzionali
riproduttive individuali (Costantini et al., 2006b; Costantini et al., 2007; Costantini et al.,
2008b, Costantini et al., 2009a). L’attivazione di una banca operativa del DNA, estratto
dai campioni di piuma, è stata definita in funzione di possibili ulteriori applicazioni
biotecnologiche genetiche (stima della consanguineità, analisi di paternità).
Conclusioni
La determinazione genetica del sesso nell’avifauna selvatica protetta realizzata da DNA
estratto da piuma, risulta metodica rapida e affidabile. Le tecniche non invasive (PCR e
PCR-RFLP) per il sessaggio genetico realizzate a partire da campioni (due-tre piume), il
cui prelievo non comporta nessun rischio per la salute dei volatili, si confermano di scelta e
trovano applicazione nella pratica clinica corrente, per la definizione del sesso di esemplari
di specie monomorfiche e dimorfiche (immaturi), per i quali si intende evitare lo stress
anestesiologico e chirurgico.
La regolare estrazione del DNA, realizzata dopo conservazione dei campioni di piume a
temperatura ambiente anche per anni, conferma che la metodica è di agile applicazione in
campo e conveniente in quanto il prelievo e l’invio dei campioni, ai laboratori specializzati,
possono essere effettuati, con mezzi ordinari, direttamente dal personale dei Parchi, Centri di
Ricerca e Centri di Recupero Animali Selvatici (CRAS) che intendono sviluppare programmi
di conservazione integrata di specie prioritarie dell’avifauna selvatica protetta.
Ulteriori protocolli di ricerca sono previsti per la definizione della metodica di determinazione
neonatale genetica del sesso da piuma e/o membrana testacea di specie prioritarie, in funzione
Il Grifone in Italia