12.06.2015 Views

Pseudomonas syringae DC3000 levaansukraasi Lsc3 katalüütilise ...

Pseudomonas syringae DC3000 levaansukraasi Lsc3 katalüütilise ...

Pseudomonas syringae DC3000 levaansukraasi Lsc3 katalüütilise ...

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

LISA 2<br />

Ni +2 -afiinsuskromatograafiaga puhastatud mutantsete <strong>Lsc3</strong> valkude P222L, D225A ja D225N<br />

puhastamise etappidest võetud proovid ning nende analüüs denatureerival<br />

polüakrüülamiidgeelil (SDS-PAGE). Rekombinantest rakuekstrakti kanti rajale 10 µg ja 5 µl<br />

proovi igast pesu- ja 1 µl elueerimise etapist. M – valgu suurusmarker PageRuler TM SM0671<br />

(Fermentas).<br />

M 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9.<br />

<strong>Lsc3</strong> P222L valgu puhastuse etappide<br />

kontrollimine SDS-geelil. Rajad: 1. rakulüsaat;<br />

2-5. Ni +2 -maatriksi pesud<br />

sonikeerimispuhvriga; 6-8. <strong>levaansukraasi</strong><br />

elueerimine; 9. puhastatud muteerimata <strong>Lsc3</strong><br />

valk.<br />

M 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9.<br />

<strong>Lsc3</strong> D225A valgu puhastuse etappide<br />

kontrollimine SDS-geelil. Rajad: 1. rakulüsaat;<br />

2-5. Ni +2 -maatriksi pesud sonikeerimispuhvriga;<br />

6-8. <strong>levaansukraasi</strong> elueerimine; 9. puhastatud<br />

muteerimata <strong>Lsc3</strong> valk.<br />

M 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9.<br />

<strong>Lsc3</strong> D225N valgu puhastuse etappide<br />

kontrollimine SDS-geelil. Rajad: 1. puhastatud<br />

muteerimata <strong>Lsc3</strong> valk; 2-5. Ni +2 -maatriksi<br />

pesud sonikeerimispuhvriga; 6-8.<br />

<strong>levaansukraasi</strong> elueerimine; 9. rakulüsaat.<br />

41

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!