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Identifikation und funktionale Charakterisierung - Logo Dragon-Ivf ...

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4.2.6 Der Effekt von 2-APB <strong>und</strong> Capsazepine auf Spermatogonien<br />

Ergebnisse<br />

In allen untersuchten Kulturen konnten Ströme abgeleitet werden, die aufgr<strong>und</strong> ihrer<br />

individuellen Strom-Spannungs-Kennlinien nicht eindeutig als „klassische“<br />

spannungsaktivierte Ionenkanäle identifizieren werden konnten. Da die gemessenen<br />

Kennlinien (s. Abb. 4.28 A-D, Kontrollspur (links)) Ähnlichkeiten mit TRP-Kanälen<br />

aufwiesen, wurden die Blocker 2-APB <strong>und</strong> Capsazepine getestet. Der Antagonist 2-APB<br />

blockt in der TRPC Familie TRPC1-6, sowie in der TRPM Familie TRPM2-3 <strong>und</strong> TRPM8.<br />

Der Antagonist Capsazepine hingegen blockt in der TRPM Familie TRPM8, sowie in der<br />

TRPV Familie TRPV1 (siehe www.clapham.tch.harvard.edu). Für die Versuche wurde 2-<br />

APB in einer Konzentration von 50 µM eingesetzt <strong>und</strong> Capsazepine in einer Konzentration<br />

von 20 µM. Spannungsrampen von -100 mV bis +100 mV zeigten, das sich in 51 % aller<br />

gemessenen Zellen Ströme durch 2-APB blockieren ließen (n = 34/67) (s. Abb. 4.28 A). Des<br />

Weiteren konnte in 26 % aller gemessenen Zellen (n = 16/61) ein Effekt von Capsazepine<br />

beobachtet werden (s. Abb. 4.28 B). In Experimenten, bei denen die Wirkung beider<br />

Antagonisten in denselben Spermatogonien untersucht wurde, zeigte, dass eine individuelle<br />

Zelle entweder nur durch 2-APB (s. Abb. 4.28 D, n = 8) oder nur durch Capsazepine inhibiert<br />

wurde (s. Abb. 4.28 C, n = 2). Keine der getesteten Zellen ließ sich durch beide Antagonisten<br />

beeinflussen.<br />

Zur weiteren Untersuchung wurde mit Ruthenium Rot ein dritter, vergleichsweise<br />

unspezifischer Antagonist getestet. Ruthenium Rot inhibiert TRPC3, TRPM6 <strong>und</strong> TRPV1-6<br />

(www.clapham.tch.harvard.edu). Keine der getesteten Zellen wurde durch Ruthenium Rot<br />

inhibiert.<br />

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