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Impact des métaux lourds sur les interactions plante/ver de terre ...

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Partie C : Résultats – Chapitre C-III(1) Au mo<strong>de</strong> <strong>de</strong> conservation <strong><strong>de</strong>s</strong> échantillons avant leur analyse (vonWinzingero<strong>de</strong> et al., 1997).(2) A l’efficacité <strong>de</strong> l’extraction qui varie avec le type d’échantillon, le type <strong>de</strong>microorganisme et leur état physiologique (Moran et al., 1993).(3) A l’amplification préférentielle <strong><strong>de</strong>s</strong> séquences <strong>de</strong> certains taxons par rapportà d’autres (Zheng et al., 1996 ; Suziki et Giovannoni, 1996).‣ Ainsi il est estimé que la technique DGGE ne peut détecter que 1 à 2% <strong><strong>de</strong>s</strong>populations microbiennes représentant <strong>les</strong> espèces dominantes dans un échantillonenvironnemental (MacNaughton et al., 1999). La combinaison avec une autre techniqueest nécessaire pour confirmer nos résultats. Parallèlement, <strong>les</strong> ban<strong><strong>de</strong>s</strong> d’ADN doiventêtre excisées, clonées et séquencées pour une détermination plus précise (Insam, 2001).tel-00486649, <strong>ver</strong>sion 1 - 26 May 2010‣ Il est possible également que le génome d’une souche bactérienne puisse êtremodifié à la suite d’une pollution pour retrou<strong>ver</strong> par la suite sa structure initiale.Rasmussen et Sørensen (2001) ont ainsi analysé l’effet du mercure <strong>sur</strong> la di<strong>ver</strong>sitébactérienne en calculant l’indice <strong>de</strong> Shannon basé <strong>sur</strong> la quantification du signal <strong>de</strong>chaque ban<strong>de</strong> DGGE et ils ont pu montrer qu’après une légère diminution initiale <strong>de</strong> ladi<strong>ver</strong>sité, celle-ci tendait à augmenter lentement et constamment durant le temps <strong>de</strong>l’expérience. Ainsi, la di<strong>ver</strong>sité bactérienne estimée à la fin <strong>de</strong> l’inoculation s’est avéréeêtre supérieure à la di<strong>ver</strong>sité initiale.‣ Enfin, la structure <strong><strong>de</strong>s</strong> communautés bactériennes initia<strong>les</strong> dans le sol est abondanteet variée mais, lorsque <strong>les</strong> conditions environnementa<strong>les</strong> ne sont pas favorab<strong>les</strong>,beaucoup d’entre el<strong>les</strong> sont en dormance (Stenstrom et al., 2001). Ainsi, <strong><strong>de</strong>s</strong> bactériesdont la croissance et l’activité sont inhibées par la présence <strong>de</strong> Pb ne peuvent réagir à laprésence <strong><strong>de</strong>s</strong> <strong>ver</strong>s <strong>de</strong> <strong>terre</strong> (Gutierrez et Jones, 2006 ; Pawlett et al., 2009).3/ Di<strong>ver</strong>sité bactérienne fonctionnelleLa structure taxonomique <strong><strong>de</strong>s</strong> communautés bactériennes restant stable dans nosdifférentes expérimentations, nous avons entrepris <strong>de</strong> déterminer leur di<strong>ver</strong>sité fonctionnelle.Pour cela, <strong>les</strong> plaques enzymatiques Biolog GN2 qui permettent <strong>de</strong> déterminer l'activitépotentielle <strong><strong>de</strong>s</strong> communautés bactériennes ont été utilisées. Ces plaques ont en fait été113

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