02.07.2013 Views

teknik pembibitan tanaman dan produksi benih jilid 2 smk

teknik pembibitan tanaman dan produksi benih jilid 2 smk

teknik pembibitan tanaman dan produksi benih jilid 2 smk

SHOW MORE
SHOW LESS

Create successful ePaper yourself

Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.

menunjukkan kecepatan<br />

pembelahan sel yang berbeda<br />

pula.Jenis <strong>tanaman</strong> yang<br />

menghasilkan kalus, meliputi<br />

dikotil berdaun lebar, monokotil<br />

gymnospermae, pakis, <strong>dan</strong> juga<br />

moss. Bagian <strong>tanaman</strong> seperti<br />

embrio muda, hipokotil, kotiledon,<br />

<strong>dan</strong> batang muda, merupakanbagian<br />

yang mudah untuk<br />

dediferensiasi <strong>dan</strong> menghasilkan<br />

kalus.<br />

Eksplan yang telah disterilkan<br />

dikulturkan dalam media kultur<br />

(MS+BAP). Setelah terbentuk tunas,<br />

tunas tersebut disubkultur dalam<br />

media multiplikasi (MS+BAP) <strong>dan</strong><br />

beberapa komponen organik lainnya.<br />

Suatu contoh prosedur dalam inisiasi<br />

kultur kalus, dapat diperoleh dengan<br />

menumbuhkan potongan wortel dekat<br />

lingkaran kambium, di dalam media<br />

MS. Tahapannya adalah sebagai<br />

berikut.<br />

Tahap awal adalah proses<br />

persiapan eksplan. Wortel yang<br />

segar <strong>dan</strong> yang kotor cuci wortel<br />

dengan detergent, kupas kulit<br />

luarrnya, lalu iris dalam potongan<br />

kecil. Sterilkan dalam alkohol 70%<br />

selama 1 menit. Bilas dengan<br />

aquadest steril. Rendam dalam<br />

larutan clorox 20X, seiama 10 menit.<br />

Bilas lagi 3 kali dalam aquadest.<br />

Bagian ujung eksplan yang keluar<br />

dari larutan sterilisasi, dipotong ambil<br />

bagian kambium <strong>dan</strong> tanam di dalam<br />

larutan 77:2 media ES dengan<br />

hormon 2,4-D.<br />

Mempersiapkan media <strong>dan</strong><br />

lingkungan kultur, gunakan media<br />

MS yang diberi tambahan 2,4-D 1<br />

mg/l; sukrosa 30 gr/1, agar 8 gr/l.<br />

Setelah dipanaskan untuk<br />

melarutkan agar, media<br />

dimasukkan ke dalam botol 75 ml<br />

masing-masing 15 ml, lalu ditutup<br />

dengan aluminium foil. Setelah<br />

diautoclave, media disimpan dulu<br />

selama 3 hari dalam keadaan gelap.<br />

Untuk media yang tidak<br />

terkontaminasi dipergunakan untuk<br />

inisiasi kultur.<br />

Tiga eksplan ditanam dalam<br />

satu botol media. Ketiga eksplan<br />

ini dianggap sebagai satu unit<br />

percobaan. Kultur diberi label yang<br />

berisi keterangan tentang jenis<br />

<strong>tanaman</strong>, bagian yang diambil,<br />

kode media, <strong>dan</strong> tanggal tanam.<br />

Kultur diletakkan pada rak<br />

terbuka di dalam ruang kultur<br />

dengan temperatur rata-rata 250C<br />

dalam diffuse light. Periksa kultur<br />

setelah satu minggu, untuk melihat<br />

perkembangan kultur.<br />

Setelah 4 minggu, kalus yang<br />

friable dapat disubkultur pada<br />

media baru. Untuk melihat sel,<br />

dapat dipergunakan mikroskop<br />

cahaya dengan pembesaran 1000<br />

kali, setelah sel itu diberi larutan<br />

toluidine blue (0.05% w/v).<br />

Lakukan pengamatan pertumbuhan<br />

kalus. Untuk itu parameter<br />

pertumbuhan yang digunakan<br />

untuk pengaruh media, eksplan,<br />

<strong>dan</strong> faktor-faktor lain, adalah<br />

berat basah kalus, berat kering<br />

kalus, <strong>dan</strong> diameter kalus<br />

9.6 Kultur Suspensi Sel<br />

Kalus yang diperoleh dari kultur<br />

kalus, dapat dipindahkan ke media cair<br />

untuk inisiasi kultur suspensi sel, atau<br />

dipindahkan ke media lain untuk<br />

diregenerasi menjadi <strong>tanaman</strong>.<br />

Regenerasi <strong>tanaman</strong> dapat melalui<br />

organogenesis atau embriogenesis.<br />

Dalam organogenesis, kalus dapat<br />

membentuk akar atau tunas, atau keduaduanya.<br />

Dalam kultur kalus yang hanya<br />

membentuk akar, seringkali dijumpai<br />

Tehnik pem<strong>benih</strong>an Tanaman 363

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!