teknik pembibitan tanaman dan produksi benih jilid 2 smk

kesulitan untuk memperoleh pucuk dari
akar tersebut.
Gambar 9.10
Pengamatan pertumbuhan kalus
Tetapi bila regenerasi terjadi melalui
pembentukan tunas terlebih dahulu, maka
kemungkinan induksi akar lebih mudah.
Sedangkan dalam embryogenesis,
pembentukan pucuk dan akar sudah
terintegrasi dalam satu sumber, dan
merupakan suatu sistem tertutup (closed
system) yang tidak berhubungan dengari
jaringan asalnya. Kultur suspensi sel
merupakan suatu sistem yang sesuai
untuk mempelajari metabolisme sel,
pengaruh berbagai persenyawaan pada
sel, serta diferensiasi sel.
Sedangkan dalam segi praktisnya,
kultur suspensi sel dipergunakan sebagai
sumber:
Sel-sel untuk protoplasma
Sel-sel yang akan diberi perlakuan
mutagen kimia
Sel untuk studi hubungan hostpatogen
adalah fitopatologi
Massa untuk produksi bahan-bahan
sekunder
Sel-sel untuk media seleksi.
Inisiasi kultur dari kalus, merupakan cara
yang paling sederhana dan banyak
dilakukan. Kalus yang segar kirakira
200 - 250 mg dapat dipindahkan ke
40 ml media cair dalam botol erlenneyer
125 ml. Kultur kemudian diletakkan pada
shaker dan dikocok dengan kecepatan
90-100 rpm secara terus menerus.
Penanbahan auksin dalam suspensi
menghasilkan kultur sel yang terpisah
(dispersed). Kultur suspensi dikocok
supaya:
Pemecahan gumpalan se1 menjadi
agregat kecil dan sel tunggal,
Distribusi sel yang merata dalam
media,
Pertukaran gas antara media dan
udara.
Dalam suspensi sel dikenal dua
kelompok kultur, yaitu: kultur batch dan,
continuous. Kultur sel batch adalah kultur
dalam media hara dengan volume tetap,
tetapi dengan konsentrasi hara yang
berubah sesuai dengan tingkat
pertumbuhan sel. Sebagai contoh:
misainya kultur berisi 20-75 ml media.
Selama masa inkubasi, terjadi
pertambahan biomass yang mengikuti
pola sigmold.Setelah mencapai suatu
masa tertentu, sel berhenti membelah
karena kehabisan hara dan akumulasi
metabolik yang toxic. Setelah mencapai
fase ini, kultur batch harus
diperbarui/diperbanyak.
Perbanyakan dilakukan dengan
memindahkan sejumlah kecil sel dan
disubkultur pada media baru. Kultur
continuous merupakan kultur sel jangka
panjang dengan suplai hara yang konstan
dalam wadah yang besar. Dalam kultur ini
terdapat sistem untuk sirkulasi
mengeluarkan media lama dan ditambah
dengan media yang baru. Dalam kultur
sel continuous terdapat dua tipe, yaitu
tipe tertutup (closed type) dan tipe
terbuka (open type)
Dalam tipe tertutup, sel bertambah
terus tanpa dipanen, hanya media yang
disirkulasi. Sedangkan pada tipe terbuka,
penapbahan media baru disertai juga
dengan panen sel. Tipe kultur contnuous
yang terbuka dapat menggunakan
chemostat atau turbidostat. Chemostat
menggunakan standard konsentrasi
bahan-bahan kimia tertentu yang
mengatur laju pertumbuhan, misalnya
kadar N, P, atau glukosa. Persenyawaan
N, P, atau glukosa, diatur sedemikian
rupa pada suatu level yang tetap untuk
mengatur populasi sel yang tertentu.
364