Terapia prechirurgica della fibromatosi uterina - FedOA - Università ...

soluzione di substrato cromogeno è stata utilizzata la 3,3 diaminobenzidina
(DAB, Laboratori Vector, Burlingame, CA) con lo 0.3% di H2O2. Dopo la
colorazione nucleare con ematossilina, le sezioni sono state montate con
mezzo sintetico (Entellan, Merck, Dermstad, Germania).
I controlli positivi per l’espressione dei due anticorpi testati sono stati
eseguiti su tessuto uterino normale per il TGF-β3 e su tessuto connettivo della
fase iniziale della cicatrizzazione per il CTGF. I controlli negativi sono stati
effettuati sugli stessi tessuti utilizzando un siero non specifico non immune
invece degli anticorpi primari.
La colorazione immunoistochimica è stata valutata separatamente da due
osservatori, in cieco rispetto ai dati clinici delle pazienti.
Sono stati selezionati in maniera casuale almeno 10 campi ad alto
ingrandimento da aree rappresentative dei campioni di leiomiomi, cinque dalla
periferia e cinque dalla regione centrale, e di miometrio.
Per ciascun anticorpo utilizzato, sono state considerate positive soltanto
le cellule con una ben definita colorazione marrone del citoplasma.
L’espressione immunoistochimica è stata quantificata utilizzando un metodo
semiquantitativo: per ciascun caso, il numero di fibrocellule muscolari lisce
positive è stato espresso come percentuale di cellule colorate sul totale delle
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