Terapia prechirurgica della fibromatosi uterina - FedOA - Università ...

dal database del nostro Istituto di Anatomia Patologica, allo scopo di valutare
le caratteristiche del confine tra mioma e miometrio utilizzando la colorazione
ematossilina-eosina.
Da ciascun leiomioma asportato sono stati ottenuti tre blocchi inclusi in
paraffina e da ognuno di essi sono state tagliate sezioni seriali dello spessore
di 4 μm. Una sezione è stata colorata con ematossilina ed eosina ed esaminata
per confermare la diagnosi originaria, escludendo le aree di necrosi.
Le sezioni ottenute dai leiomiomi sono state trattate con la tecnica di
estrazione antigenica indotta dal calore mediante incubazione in forno a
microonde a 650 W (tre passaggi sequenziali di quattro minuti ciascuno, in
soluzione di citrato a 10 mM - pH 6.0), per lo smascheramento dell’antigene, e
poi incubate per venti minuti a temperatura ambiente con 0.3% di perossido di
idrogeno in metanolo, per attenuare la perossidasi endogena.
Per prevenire l’immunocolorazione aspecifica è stata eseguita
un’ulteriore incubazione con siero di topo non immune (1:20, Dakopatts,
Hamburg, Germania) diluito in PBS-albumina sierica bovina (1%) per 25
minuti. Dopo tre lavaggi con TRIS-soluzione salina, è stata effettuata una
immunocolorazione con un anticorpo primario anti-PCNA (PC10,
monoclonale, 1:200, DBA) per studiare l’espressione dell’antigene PCNA. Per
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