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Applied Biosystems StepOne™ System Real-Time PCR System ...

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Capitolo 5 Analisi dell'esperimento<br />

Visualizzazione delle impostazioni di analisi<br />

Per ulteriori<br />

informazioni<br />

Per ulteriori informazioni sul Plot di amplificazione o sulla visualizzazione dei plot<br />

multipli accedere alla voce Help (Guida) del software StepOne facendo clic su o<br />

selezionando Help (Guida)StepOne Help (Guida StepOne).<br />

Visualizzazione delle impostazioni di analisi<br />

Nel caso non si sia soddisfatti della modalità con la quale il software StepOne richiede i<br />

genotipi o le soglie degli indicatori CQ, rivedere e regolare le impostazioni di analisi e/o<br />

le richieste come necessario.<br />

Informazioni sui<br />

dati dell'esempio<br />

Modifica delle<br />

impostazioni di<br />

analisi<br />

Nell'esperimento di esempio, rivedere e regolare le impostazioni di analisi come<br />

desiderato per imparare le modalità in cui le impostazioni di richiesta, del C T e degli<br />

indicatori contribuiscono all'analisi dei dati di genotipizzazione.<br />

1. Nell'esperimento, fare clic su Analysis Settings (Impostazioni di analisi).<br />

2. Selezionare C__11711420_30 dalla tabella Select a SNP Assay (Seleziona un<br />

saggio SNP).<br />

3. Fare clic su Edit Default Settings (Modifica impostazioni predefinite).<br />

4. Nel caso siano state eseguite richieste manuali, selezionare Keep Manual Calls<br />

from Previous Analysis (Mantieni richieste manuali dall'analisi precedente)<br />

nella casella di dialogo Edit Default SNP Assay Settings (Modifica impostazioni<br />

saggi SNP predefinite).<br />

5. Nel campo Quality Value (Valore qualità), immettere un valore percentuale per<br />

applicarlo come intervallo di qualità per i campioni autocalling. A un valore<br />

maggiore corrisponde una richiesta di alleli più rigorosa.<br />

6. Fare clic su Save Changes (Salva modifiche) per salvare le impostazioni.<br />

7. Regolare le impostazioni del C T :<br />

a. Selezionare la scheda Ct Settings (Impostazioni Ct).<br />

b. Selezionare l'allele A dalla tabella Select an Allele (Seleziona un allele), quindi<br />

deselezionare Use Default Settings (Utilizza impostazioni predefinite),<br />

c. Deselezionare Automatic Threshold (Soglia automatica), quindi immettere<br />

un nuovo valore di soglia.<br />

d. Deselezionare Automatic Baseline (Linea di base automatica), quindi<br />

immettere nuovi valori della linea di base.<br />

e. Ripetere i passaggi 7b fino a 7d per l'allele C.<br />

Nota: Per ulteriori informazioni sull'impostazione dei cicli soglia per le<br />

esecuzioni di genotipizzazione, vedere la Guida software StepOne software<br />

Help.<br />

Note<br />

Guida introduttiva al sistema <strong>Applied</strong> <strong>Biosystems</strong> StepOne <strong>Real</strong>-<strong>Time</strong> <strong>PCR</strong> <strong>System</strong> per gli esperimenti di<br />

genotipizzazione<br />

RISERVATO - Esclusivamente per uso interno AB. Non distribuire.<br />

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