Applied Biosystems StepOne™ System Real-Time PCR System ...

Glossario
linea di base
linea di base
automatica
linea di base
manuale
linea di regressione
metodo C T
comparativo (∆∆C T )
metodo della curva
standard
metodo della curva
standard relativa
metodo di
esecuzione
metodo di
quantificazione
miscela di primer
miscela di reazione
miscela
primer/sonda
Nel plot di amplificazione, linea adeguata ai livelli di fluorescenza per un range definito
di cicli. In caso di utilizzo dell'impostazione di analisi con linea di base manuale, per la
determinazione della linea di base Applied Biosystem raccomanda di selezionare cicli
precoci della PCR.
Impostazione di analisi in cui il software calcola i valori di inizio e di fine della linea di
base per il plot di amplificazione. Il software utilizza la linea di base e la soglia per
calcolare il ciclo soglia (C T ).
Impostazione di analisi in cui vengono immessi i valori di inizio e di fine della linea di
base per il plot di amplificazione. Il software utilizza la linea di base e la soglia per
calcolare il valori del C T .
Negli esperimenti con curva standard e curva standard relativa, la migliore linea adeguata
alla curva standard. Formula della linea di regressione:
C T = m [log (Qtà)] + b
dove m rappresenta la pendenza, b l'intercetta y e Qtà la quantità standard.
Vedere anche coefficienti di regressione.
Metodo di quantificazione per esperimenti di quantificazione. Con il metodo C T
comparativo (∆∆C T ), vengono utilizzati i risultati provenienti da un campione di
riferimento e da un controllo endogeno per determinare le quantità relative di un target
nei campioni.
Metodo di quantificazione per esperimenti di quantificazione. Con il metodo della curva
standard, vengono utilizzati i risultati provenienti dagli standard per determinare le
quantità relative di un target nei campioni.
Metodo di quantificazione per esperimenti di quantificazione. Con il metodo della curva
standard relativa, vengono utilizzati i risultati provenienti dagli standard, da un campione
di riferimento e da un controllo endogeno per determinare le quantità relative di un target
nei campioni.
Definizione del volume della reazione e del profilo termico per la sessione analitica dello
strumento.
Con gli esperimenti di quantificazione, il metodo utilizzato per determinare la quantità di
target nei campioni. Per gli esperimenti di quantificazione, esistono tre tipi di metodi di
quantificazione disponibili: curva standard, C T comparativo (∆∆C T ) e curva standard
relativa.
Componente della reazione PCR contenente il forward primer e il reverse primer
disegnati per amplificare il target.
Soluzione contenente tutti i componenti necessari per eseguire la reazione PCR, ad
eccezione del templato (campione, standard o controllo).
Componente della reazione PCR che consiste nei primer disegnati per amplificare il target
e una sonda TaqMan ® disegnata per rilevare l'amplificazione del target.
Guida introduttiva al sistema Applied Biosystems StepOne Real-Time PCR System per gli esperimenti di
genotipizzazione
RISERVATO - Esclusivamente per uso interno AB. Non distribuire.
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