Applied Biosystems StepOne™ System Real-Time PCR System ...

Capitolo 3 Preparazione delle reazioni
Preparazione della piastra di reazione
• Nel caso venga utilizzata pellicola adesiva ottica per sigillare le piastre, sigillare
ogni piastra come segue:
Azione
Esempio
1. Posizionare la piastra di reazione ottica a 48 pozzetti sulla parte
centrale della base di supporto splash free a 96 pozzetti.
Verificare che la piastra sia aderente alla superficie superiore
della base di supporto.
2. Caricare la piastra di reazione ottica a 48 pozzetti come
desiderato.
3. Rimuovere una pellicola adesiva ottica singola dalla scatola.
Flettere verso l'alto entrambe le linguette terminali. Tenere la
pellicola adesiva ottica col lato posteriore verso l'alto.
4. Con un solo rapido movimento, staccare la protezione dalla
superficie centrale sigillante. Non toccare la superficie centrale
sigillante.
5. Tenendo la pellicola adesiva ottica per le alette terminali,
adagiare la pellicola ottica sulla piastra di reazione a 48 pozzetti
(con il lato adesivo posto a contatto con la piastra). Verficare che
la pellicola ricopra completamente tutti i pozzetti della piastra.
6. Muovere l'applicatore lentamente su tutta la pellicola adesiva,
esercitando una ferma pressione, orizzontalmente e
verticalmente, per garantire un contatto ottimale tra la pellicola e
la piastra su tutta la superficie della piastra di reazione.
7. Mentre è in atto l'utilizzo dell'applicatore per mantenere il bordo
della pellicola in posizione, afferrare una estremità dell'aletta e
tirare verso l'alto e strappare bruscamente. Ripetere per l'altra
aletta.
8. Ripetere il passaggio 7. Muovere l'applicatore orizzontalmente e
verticalmente, con ferma pressione, sulla pellicola adesiva ottica
per ottenere una sigillatura ermetica, a prova di evaporazione.
9. Per garantire una sigillatura ermetica, passare la estremità
dell'applicatore con ferma pressione sui quattro lati del bordo
esterno della pellicola adesiva ottica. Ispezionare la piastra per
verificare che tutti i pozzetti siano sigillati (controllare che sia
presente una impronta di tutti i pozzetti sulla superficie della
pellicola adesIva ottica).
IMPORTANTE! Una azione impropria di rimozione della
protezione dalla pellicola può provocare un effetto di
appannamento sulla pellicola stessa, ma non influenza i risultati.
L'appannamento scompare quando la pellicola entra in contatto
con il pannello di copertura riscaldato nello strumento.
Nota: Le pellicole adesive ottiche non aderiscono al semplice
contatto. È necessaria l'applicazione di pressione per garantire una
sigillatura ermetica, a prova di evaporazione.
Note
Guida introduttiva al sistema Applied Biosystems StepOne Real-Time PCR System per gli esperimenti di
genotipizzazione
RISERVATO - Esclusivamente per uso interno AB. Non distribuire.
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