KORRIGERT UTGAVE / CORRECTED VERSION - Patentstyret

NO/EP 2276756
161
5
10
Til en oppløsning av 8 mg (0,01 mmol) tert-butyl (2S, 5R)-2-(4-{[2-(2-amino-
1,3-tiazol-4-yl)propanoyl]amino}benzyl)-5-[(R)-{[tert-butyl(dimetyl)silyl]oksy}(3-
fluorfenyl)metyl] pyrrolidin-1-karboksylat (isomer 1) i 0,20 ml metanol fra Trinn A ble
det tilsatt 0,20 ml konsentrert HCl og reaksjonsblandingen ble omrørt ved
romtemperatur i 1 t. Azeotrop behandling med toluen (2x) for å fjerne vann. Residuet
ble tatt opp i acetonitril/vann/MeOH (9:1:1) og renset på Gilson HPLC ved eluering
med en 0-50% gradient av acetonitril/vann med 0,05% TFA-buffer. Fraksjonene
inneholdende produktet ble kombinert, frosset og lyofilisert hvilket ga et hvitt skum
(Eksempel 274) (5,1 mg, 88%). m/z (ES) 440 (MH) + .
Ved anvendelse av de biologiske analysene beskrevet ovenfor ble human β3
funksjonell aktivitet av Eksempel 274 bestemt til å være mellom 11 og 100 nM.
15
Trinn C: N-[4-({(2S, 5R)-5-[(R)-(3-fluorfenyl)(hydroksy)metyl]pyrrolidin-2 yl} metyl)
fenyl]-2-(1,3-tiazol-4-yl)propanamid (isomer 1) (Eksempel 275)
20
25
30
Til en oppløsning av 8 mg (0,01 mmol) tert-butyl (2S, 5R)-2-(4-{[2-(2-amino-
1,3-tiazol-4-yl)propanoyl]aminobenzyl)-5-[(R)-{[tert-butyl(dimetyl)silyl]oksy}(3-
fluorfenyl)metyl] pyrrolidin-1-karboksylat (isomer 2) i 0,20 ml metanol fra Trinn A ble
det tilsatt 0,20 ml konsentrert HCl og reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur
i 1 t. Azeotrop behandling med toluen (2x) for å fjerne vann. Residuet ble
tatt opp i acetonitril/vann/MeOH (9:1:1) og renset på Gilson HPLC ved eluering med
en 0-50% gradient av acetonitril/vann med 0,05% TFA-buffer. Fraksjonene
inneholdende produktet ble kombinert, frosset og lyofilisert hvilket ga et hvitt skum
(Eksempel 275) (4,3 mg, 79%). m/z (ES) 440 (MH) + .
Ved anvendelse av de biologiske analysene beskrevet ovenfor ble human β3
funksjonell aktivitet av Eksempel 275 bestemt til å være mindre enn 1 nM.
EKSEMPLENE 276-281