SPRAWOZDANIE - Centrum Zdrowia Dziecka

Rozpoczęto takŜe badania jednoczesnej ekspresji innych markerów błonowych limfocytów (CD45RB,
CD45RA oraz CD27 i CD28) w populacji limfocytów T CD4+ oraz T CD8+) w obu grupach
chorych.
Badania czynnościowe obejmowały:
- określenie zakresu proliferacji limfocytów T indukowanych przeciwciałami anty-CD3 i PHA
- ocenę poziomu cytokin (IFN-gamma, IL-10, TNF-alfa, IL-12 i IL-13) w supernatantach
hodowli limfocytów indukowanych przeciwciałami anty-CD3.
U 5 chłopców z agammaglobulinemią potwierdzono mutację w genie Btk
Dotychczasowe wyniki wskazują na zmiany w dystrybucji czynnościowo róŜnych populacji
limfocytów:
- CD4/CD45RA+ (spadek ich liczby u chorych z CVID, połączony ze zmianami w zakresie
intensywności fluorescencji izoformy CD45RA oraz receptora CD4)
- CD4/CD45RO (wzrost ich liczby u chorych z CVID oraz wzrost ekspresji izoformy CD45RO
i receptora CD4)
- wzrost populacji limfocytów CD8+/CD45RO u chorych z CVID wraz ze zmianami w zakresie
ekspresji receptora CD8 i CD45RO (wysoka intensywność fluorescencji tych markerów błonowych).
TakŜe w populacji monocytów wykazano róŜnice w zakresie ekspresji receptora CD16 i CD14 (u
chorych z CVID) w porównaniu do chorych z XLA i kontrolą (tendencja do wzrostu populacji tzw.
„prozapalnych” monocytów z ekspresją CD14/CD16).
Część chorych z CVID wykazywała spadek odpowiedzi proliferacyjnej limfocytów na stymulację
przez przeciwciała anty-CD3 oraz PHA.
Profil syntezy cytokin in vitro wykazywał (u części chorych z CVID) zmiany w zakresie ich syntezy;
badania te są obecnie w trakcie wykonywania.
Po skompletowaniu wyników badań genetycznych ( XLA) dokonana będzie analiza wyników w obu
grupach chorych, dla wykazania ewentualnych róŜnic w zakresie parametrów fenotypowych
limfocytów i monocytów oraz badań czynnościowych.
Trzy prezentacje zjazdowe.
PB 0777/P05/2004/26
Tytuł: „Wpływ doustnego podawania probiotycznych bakterii Lactobacillus na skład
ekosystemu jelitowego, układ odpornościowy oraz przebieg alergii pokarmowych u niemowląt”
Kierownik grantu: doc. dr hab. n. med. BoŜena Cukrowska
Cel: Celem projektu było wykazanie wpływu nowych bakterii probiotycznych typu Lactobacillus
casei/paracasei na stan kliniczny, układ immunologiczny oraz skład ekosystemu jelitowego u dzieci z
alergią pokarmową.
Materiał i metody: Badaniami przeprowadzonymi w sposób randomizowany jako podwójnie ślepa
próba objęto 50 dzieci w wieku do 18 miesiąca Ŝycia z alergią na białka mleka krowiego objawiającą
się atopowym zapaleniem skóry. Dzieciom przez okres 3 miesięcy podawano doustnie mieszaninę 3
szczepów bakterii zawieszonych w preparacie mlekozastępczym Nutramigen w dawce dziennej 10 9 .
Grupa kontrolna otrzymała placebo (Nutramigen). Ocenę kliniczną, immunologiczną i
mikrobiologiczną wykonano trzykrotnie: przed podaniem bakterii, po zakończeniu podawania oraz 5
miesięcy później. Stan kliniczny dzieci oceniono w skali SCORAD. W surowicy krwi badano poziom
całkowitej IgE oraz poziomy cytokin prozapalnych (IFN-gamma, IL-12, IL-18), proalergicznych (IL-
4, IL-5) oraz regulujących odpowiedź immunologiczna (TGF-beta). Skład mikrofony jelitowej badano
za pomocą mikrobiologicznych metod hodowlanych.
Wyniki: W obu badanych grupach stan kliniczny dzieci poprawił się, ale tylko w grupie otrzymującej
probiotyki poprawa osiągnęła znamienność statystyczną. W grupie leczonej probiotykami indeks
SCORAD spadł z 31,6 do 15,1 (p=0.0159) po zakończeniu terapii i do 7,36 (p=0.0004) po 5-
miesięcznej obserwacji, podczas gdy w grupie placebo wartość indeksu SCORAD spadała z 33,4 do
26,3 (p=0.64) i 16,8 (p=0.135). Całkowita ilość IgE w surowicy u dzieci przyjmujących probiotyki
znacząco statystycznie spadla w ciągu 8-miesięcznej obserwacji z poziomu 222,68 do 71,04 UL/mL
(p=0.0164). W grupie placebo ilość IgE wzrosła do 345,24 UL/mL. Poziomy cytokin w surowicy nie
wykazały róŜnic pomiędzy badanymi grupami z wyjątkiem IL-18. Ilość IL-18 w grupie otrzymującej
probiotyki nie uległa zmianie podczas 8-miesięcznej obserwacji, podczas gdy w grupie kontrolnej
70