SPRAWOZDANIE - Centrum Zdrowia Dziecka

Tytuł: Modulacja ekosystemu jelitowego na drodze doustnego podawania probiotycznych
bakterii Lactobacillus u dzieci z alergią pokarmową
Kierownik: doc. dr hab. n. med. BoŜena Cukrowska
Cel: Celem projektu była ocena ilościowa i jakościowa mikroflory przewodu pokarmowego u dzieci z
alergią pokarmową w porównaniu do dzieci zdrowych oraz ocena zdolności nowych bakterii
probiotycznych typu Lactobacillus do zasiedlania przewodu pokarmowego i modulacji ekosystemu
jelitowego u dzieci alergicznych.
Materiał i metody: Zdolność nowych bakterii probiotycznych typu Lactobacillus casei/paacasei do
zasiedlania przewodu pokarmowego badano na sterylnych myszach Balb/c. Bakterie podawano
zwierzętom jednorazowo w dawce 10 9 sondą doŜołądkową. Po 7 dniach oceniono ilość bakterii
metodą hodowlaną. Badano równieŜ translokację bakteryjną przez barierę jelitową, wykonując
hodowle na agarze MRS z homogenatów krezkowych węzłów chłonnych, wątroby, śledziony oraz
całej krwi. W celu kompleksowej analizy ekosystemu jelitowego u dzieci pobrano próbki kału od 22
dzieci z alergią na białka mleka krowiego, objawiającą się atopowym zapaleniem skóry w wieku do 18
m.Ŝ. (średnia 10/12) oraz 7 zdrowych dzieci (średnia wieku 9/12). Ocenę modulacji ekosystemu
jelitowego przez bakterie probiotyczne przeprowadzono podając w sposób randomizowany dzieciom z
atopowym zapaleniem skóry mieszaninę 3 szczepów bakterii zawieszonych w preparacie
mlekozastępczym Nutramigen w dawce dziennej 10 9 . Grupa kontrolna otrzymała placebo
(Nutramigen). W próbkch kału pobranych trzykrotnie przed i po podaniu bakterii oraz 5 miesięcy
później badano ilość bakterii Lactobacillus, Bifidobacterium, Enterobacteriacae, Enterococci,
Bacteroides, Clostridium i całkowitą ilość grzybów metodami hodowlanymi, natomiast metodą
spektrofotometryczną oceniono aktywność enzymów fekalnych (beta-glukuronidazy, betaglukozydazy).
Wyniki: Bakterie Lactobacillus zasiedlały przewód pokarmowy eksperymentalnych myszy w ilości
10 9 /g kału. W grupie myszy zasiedlanych bakteriami wykazano pojedyncze kolonie bakterii (ok. 200
kolonii) jedynie w krezkowych węzłach chłonnych. Nie wyhodowano bakterii z organów
wewnętrznych ani z krwi. Analiza ilościowa mikroflory jelitowej nie wykazała róŜnic pomiędzy
dziećmi zdrowymi i alergicznymi. Nie zaobserwowano równieŜ róŜnic w aktywności enzymów
fekalnych. Ich wartości w obu grupach dzieci były podobne i wynosiły średnio ok. 0.020 mMol/mg
białka dla beta-glukuronidazy i 0.013 dla beta-glukozydazy. Podawanie probiotyków pomimo
korzystnego wpływu na stan kliniczny badanych dzieci (znamienny spadek indeksu SCORAD) nie
miało wpływu na skład ilościowy ekosystemu jelitowego. Zarówno w grupie dzieci otrzymującej
probiotyki, jak i placebo po 3 miesiącach doszło do obniŜenia całkowitej ilości bakterii
Bifidobacterium i Lactobacillus oraz do wzrostu bakterii typu Clostridium i Bacteroides. Nie
wykazano równieŜ znamiennych statystycznie róŜnic w aktywność enzymów fekalnych pomiędzy
badanymi grupami, chociaŜ w obu grupach obserwowano wzrost aktywności zarówno betaglukuronidazy,
jak i beta-glukozydazy.
Wnioski: Nasze badania pokazują, Ŝe nowe szczepy probiotycznych bakterii Lactobacillus
casi/paacasei mają zdolność zasiedlania przewodu pokarmowego i nie przenikają przez barierę
jelitową. Wydaje się, Ŝe mechanizm korzystnego wpływ tych bakterii na przebieg atopowego
zapalenia skóry u dzieci nie jest bezpośrednio związany z modulacją ekosystemu jelitowego.
Cztery prezentacje zjazdowe.
Mineralizacja (RG 3/2001)
Tytuł: “The assessment of different nutritional therapies on bone mineralization in children with
gut insufficiency"
Kierownik grantu: dr med. Małgorzata Łyszkowska
Projekt badawczy rozpoczęto w czerwcu 2001r. Do końca badania włączono 53 chorych (ponad 100%
zaplanowanej liczby badanych) w wieku od 5 do 22 lat (śr. 9 lat). Wszyscy chorzy byli leczeni z
powodu przewlekłej niewydolności jelit. śaden pacjent nie został wykluczony z grupy objętej
badaniem. Wszyscy chorzy ukończyli badanie. Ostatnie wyniki badań laboratoryjnych zostały
opracowane i wprowadzone do bazy danych w 2005r.
86