la esferocitosis hereditaria y su diagnostico en la practica clinica

cia diagnóstica en dicha enfermedad. Existe esferocitosis también en la
anemia hemolijica autoinmune, bemólisis con cuerpos de Heina, hiperesple—
mismo, enfermedad hemolítica del recién nacido y quemaduras extensas, que,
corno la elevación de HC y % Hiper no es específica de la EH, puesto que
en estas entidades aparecen hematíes con concentración de hemoglobina superior
a 4i g/dL. Se debe saber que el parámetro % Hiper mo es monopolio
de la EH, enfermedad que sólo puede diagnosricarse con seguridad si la evaluación
de esta tecnología forma parte de un conjunto de datos clínicos
hematológicos y bioquímicos compatibles con EH.
5.1.2. Estudio de la membrana eritrocítarla
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Los Indicadores de déficit parcial de la membrana eritrocitaria en es—
pectrina y ankirina proceden de la SDS—PAGE de los estromas aislados de
casos y controles por cálculo de sus contenidos en dichas proteínas o cocientes
Sp/83 y Ank/B3,
Para la obtención de buenos resultados es esencial evitar la proreolisis
de las muestras, no sólo retirando la capa leucoplaquetaria de la sangre pe-
riférica sino tambIén inhibiendo la actividad proteolitica endógena de las
propias membranas eritrocttarlas aisladas producida por proteasas originadas
ea ellas y que ejercen su papel durante el proceso de hemólisis In “itro y
subsiguientes pasos, incluso cuando las células contamInantes se han eliminado
concienzudamente, siendo ha anklrina y la banda 4.9 particularmente susceptibles
a esta acción 160, cuyos efectos estriban desde desplazamientos
más o menos graves de las bandas hacia zonas de menor peso molecular
hasta ligeras degradaciones solamente detectables por inmunohlotting. Además
se ha descrito un- mayor grado de proteolisis de la espectrina y menor de
la banda 3 por dicho proceso de autodigestión 60, ante el cual los est romas
eritrocitarios de la EH son más estables que los procedentes de controlesél.
La estrategia general es minimizar los tiempos de exposición a las proteasas
endógenas y controlar su actividad mediante inhibidores tales como el PMSF
Cferiilmetilsulionlliluoride, que reacciona rápidamente con los residuos de
serma de los centros activos de los serin—ptoteasas), del que se ha demos-
trado que suprime la degradación progresiva de la ankirlna si se adiciona
al buí lcr de hemólisis, al cual se afiaden también agentes quelanres para
evitar la activación de las proteasas calcio—dependientes de las membranas
aisladas 160, En este trabajo se han satisfecho todos estos requerimientos
con el fin de asegurar la integridad de las proteínas de la membrana entro—