trabajo profesional - Universidad Nacional Autónoma de México

NORENA CASTILLO GOMEZ
FES CUAUTITLAN - UNAM
Fundamento de la determinación
La bilirrubina se determina en suero por métodos químicos y, según la forma de
reaccionar, se diferencia clásicamente a la bilirrubina en directa e indirecta. El
término bilirrubina directa comprende fundamentalmente a la bilirrubina conjugada
con el ácido glucurónico y el término bilirrubina indirecta comprende
fundamentalmente a la que va unida a la albúmina. En el suero se determina
químicamente la bilirrubina total y directa y se calcula la indirecta por diferencia. Lo
normal es una concentración de bilirrubina total menor de 1,2 mg/Dl. y la mayor parte
es bilirrubina indirecta. En los individuos normales no debe de aparecer bilirrubina en
orina.
Principio de la prueba:
• Muestra y adición de R1 (EDTA/NaCl)
• Adición de R2 (ácido sulfanílico diazotizado) e inicio e la reacción: el ácido
sulfanílico diazotizado (producido por la reacción del nitrito de sodio acidificado
con el ácido sulfanílico) reacciona con la bilirrubina para formar una
azobilirrubina. En la prueba de la bilirrubina directa, sólo la bilirrubina conjugada
reacciona con el ácido sulfanílico diazotizado.
1) bilirrubina + ión diazonio azobilirrubina
La intensidad cromática del colorante rojo azoico es directamente
proporcional a la concentración de bilirrubina directa (conjugada) que se mide
fotométricamente. (2)
- 53 -