trabajo profesional - Universidad Nacional Autónoma de México

NORENA CASTILLO GOMEZ
FES CUAUTITLAN - UNAM
Los ensayos de proteínas totales son útiles también en la detección de
hipoproteinemia observada en la mal nutrición, enfermedades renales asociadas con
pérdida de proteínas, edema, hemorragias, procesos malignos y otras condiciones.
Es recomienda usar suero como muestra de elección. El plasma puede ser usado
pero se obtienen valores ligeramente altos debido al fibrinógeno. Muestras
hemolizadas no se deben usar.
La hemólisis debe evitarse. El color producido por 1mg. de hemoglobina es
equivalente a 1.9 mg de proteínas séricas. En las muestras lipémicas y control
lipofilizado deberá usarse blanco. Bromosulfoftaleína puede dar falsos resultados
altos. Valores de bilirrubinas menores de 25 mg/dl no interfieren. (2)
Valores de referencia: 6.0-8.2 g/dL (2)
Fundamento de la determinación
Los enlaces peptídicos de las proteínas reaccionan con el ión cúprico en medio
alcalino para dar un complejo color violeta con máxima absorción 540 nm, cuya
entidad es proporcional a la concentración de las proteínas totales de la muestra. El
procedimiento de proteínas totales es una modificación de la reacción de Biuret
descrito originalmente por Kingsley.
Proteína + Cobre ++
complejo azul- violeta
En un pH alcalino la proteína reacciona con el cobre del reactivo de Biuret causando
un aumento de la absorbancia.
El índice de incremento en absorbancia a 540 nm debido a la formación del
complejo azul-violeta es directamente proporcional a la concentración de proteínas
en la reacción. (25)
- 59 -