Appunti di Principi-BiolMol CTF - Capitolo3 - Omero

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TemperaturePCR10050Melting94 o CAnnealingPrimers50 o CExtension72 o CMelting94 o C30x3’5’5’0T i m e5’5’5’5’3’Fragments ofdefined length5’5’5’5’5’5’
Dopo n cicli il miscuglio di reazione contiene un numero massimoteorico di molecole di DNA a doppia elica pari a 2n. (Crescitaesponenziale)
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SYBR greenUtilizzauna molecola fluo
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SYBR green Dopo l’annealing dei p
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SYBR green Metodica semplicePossono
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Sonde TaqMan La sonda di tipo TaqMa
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ForwardProbeReverse
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Reporter-QuencherDyeQuencher5,6 FAM
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Curve di amplificazioneFluorescenza
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QuantificazioneASSOLUTA i campioni
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Quantificazione relativaPlot di amp
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Sonde FRET(FluorescenceResonanceEne
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Molecular Beacons Durante lo step d
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Probes : ScorpionsStep 1Lo Scorpion
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Real-Time PCR: applicazioni‣ Quan
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Analisi della sequenzanucleotidica
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ddNTP
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• Si suddivide quindi la miscela
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ddCTPddCTPddCTPPRIMERDNA Polimerasi
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• Le diverse catene polinucleotid
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Metodo di sequenziamentodel DNA “
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Sequenziamento automatizzato con ma
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Le emissioni fluorescenti vengono c
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Metodo di Sequenziamento di Maxame
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Un altro metodo per la determinazio
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• Step 1A sequencing primer is hy
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• Step 5Addition of dNTPs is perf
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What is Next-Generation Sequencing?
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Illumina sequencing technology• L
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Illumina:Sequencing-bysynthesis
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Illumina sequencing technology• S
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Overview of ABI SOLiD SequencingChe
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SOLiD TechnologyLigation-basedchemi
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Exact Call ChemistryUp to 99.99% ac
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Latest Platforms:Illumina HiSeq:•
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Campi di applicazione delle piattaf
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