Appunti di Principi-BiolMol CTF - Capitolo3 - Omero
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Le tappe del pyrosequencing possono essere riassuntecome segue: il DNA <strong>di</strong> cui si vuole determinare la sequenza vieneridotto in frammenti <strong>di</strong> un centinaio <strong>di</strong> paia <strong>di</strong> basi edenaturato così da formare DNA a singolo filamento chesarà il template; al frammento <strong>di</strong> ssDNA viene aggiunto un primer equin<strong>di</strong> un cocktail <strong>di</strong> enzimi e <strong>di</strong> substrati DNApolimerasi, ATP solforilasi, apirasi, luciferasi,adenosinfosfosolfato (APS) e luciferina; si da quin<strong>di</strong> inizio alla reazione <strong>di</strong> sintesi aggiungendo insuccessione , separatemente, uno dei 4 dNTP.Reazione catalizzata della ATP solforilasi:ATP + H 2 SO 4 APS + PPi
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