Appunti di Principi-BiolMol CTF - Capitolo3 - Omero

Il principio del procedimento può esserebrevemente riassunto: si prepara una miscela direazione contenete• - il frammento di DNA da sequenziare,denaturato, quindi a singolo filamento;• - un primer, cioè una breve sequenza nucleotidicacon le estremità 3’ e 5’ libere;• - una DNA polimerasi con elevata processività ebassa attività esonucleasica (sia in direzione 5’-3’,sia in direzione 3’-5’; as es. Sequenasi delcommercio);• - i 4 dNTP;• - un dNTP marcato con 32 P o con 35 S (incorporatoin una base modificata).