Appunti di Principi-BiolMol CTF - Capitolo3 - Omero

• Uno dei metodi più comunemente usati per questaanalisi è quello di Sanger, detto anche metodo dellaterminazione della catena o deididesossiribonucleotidi (ddNTP).• Si tratta di una metodica elegante e relativamentesemplice che consiste nel far sintetizzare frammenti dicatena polinucelotidica di lunghezza diversa sullostampo del DNA che si vuole sequenziare. Ciò siottiene facendo avvenire la sintesi della nuova catenautilizzando oltre ai 4 dNTP anche uno dei 4 ddNTP. Inpresenza di DNA polimerasi un ddNTP può essereincorporato all’estremità 3’ di una catena nucleotidicain accrescimento su uno stampo di DNA, ma non puòpoi legare un altro nucleotide perchè non èdisponibile l’OH in 3’.