Appunti di Principi-BiolMol CTF - Capitolo3 - Omero

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Reporter-Quencher5’ REPORTER (R): fluorocromo ad alta energia che emettefluorescenza3’ QUENCHER (Q): fluorocromo a bassa energia chespegne la fluorescenza del reporterSe R e Q si trovano vicini, Q spegne l'effetto <strong>di</strong> Rperchè i fotoni <strong>di</strong> R vengono assorbiti da Q
Real-Time PCR:attività 5’>3’ esonucleasica3’5’3’RQ5’RQ5’3’ 5’RQ5’3’ 5’
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Impieghi della PCR• Strategie di
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TemperaturePCR100Melting94 o C500T
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TemperaturePCR10050Melting94 o CAnn
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Dopo n cicli il miscuglio di reazio
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Fasi della PCR Denaturazione (melti
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• * Si possono usare al posto del
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Nested PCR
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Hot Start PCR
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Illumina sequencing technology• L
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Illumina:Sequencing-bysynthesis
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Overview of ABI SOLiD SequencingChe
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Bead DepositionDeposit 3’ modifie
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SOLiD TechnologyLigation-basedchemi
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Exact Call ChemistryUp to 99.99% ac
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Campi di applicazione delle piattaf
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