Appunti di Principi-BiolMol CTF - Capitolo3 - Omero

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Run Real-Time thermal cycle3 min95°C15 s50 cycles50°CActivatesAmplitaq Gold55°C65°C1 min2 min30 sActivatesUNG (Uracile N-Glicosilasi)
Curve di amplificazioneFluorescenzaCicli di amplificazionePer ogni campione si ottiene una curva di amplificazione il cuiC T (=Threshold Cycle) è inversamente proporzionale alla quantità ditemplate iniziale
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Impieghi della PCR• Strategie di
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TemperaturePCR100Melting94 o C500T
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TemperaturePCR10050Melting94 o CAnn
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TemperaturePCR10050Melting94 o CAnn
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Dopo n cicli il miscuglio di reazio
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Fasi della PCR Denaturazione (melti
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• * Si possono usare al posto del
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Nested PCR
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Hot Start PCR
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Sintesi del cDNA
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Page 119: • Step 5Addition of dNTPs is perf
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Illumina sequencing technology• S
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Overview of ABI SOLiD SequencingChe
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Bead DepositionDeposit 3’ modifie
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SOLiD TechnologyLigation-basedchemi
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Exact Call ChemistryUp to 99.99% ac
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Latest Platforms:Illumina HiSeq:•
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Campi di applicazione delle piattaf
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