Appunti di Principi-BiolMol CTF - Capitolo3 - Omero

PCR-SSCP (Single Strand ConformationPolymorphism)• Visualizzazione delle bande: a) uso di una molecola intercalante(bromuro di etidio o SYBR green II); b) colorazione con nitratod’argento; c) mediante autoradiografia se durante la PCR gliampliconi sono stati radiomarcati utilizzando o primers radiomarcatio dNTP radiomarcati; d) medinate fluorescenza se i primers sonomarcati con fluorofori.• Gli individui che sono omozigoti “wild-type” per il locus genicoche viene analizzato mostreranno due bande distinte nel gel, cosìcome gli individui che sono omozigoti mutanti. Tuttavia, comeconseguenza del cambiamento nucleotidico, i prodotti di PCR deimutanti migreranno con una diversa mobilità. Gli individui chesono eterozigoti mostreranno un “pattern” di quattro bande.